使用 Cpf1 基因编辑纠正 DMD 基因突变

2017-04-15 基因治疗领域

来源：健点子 ihealth

此研究成果是由德克萨斯大学的西南医学中心研究人员发表。

该研究显示，使用来自 Prevotella 和 Francisella 1(Cpf1)，这是一种通常使用的基因编辑 CRISPR 的相关蛋白 9（Cas9）的酶替代物，可以校正动物模型以及人细胞中的疾病相关病变。

这个研究发表在科学进步杂志（Science Advances）上，可能对杜氏肌营养不良的治疗有突破性意义。

在文章中，德州大学西南团队使用来自 DMD 患者纤维细胞的诱导多能干细胞（iPS），利用 CRISPR-Cpf1 来破坏外显子 51 中的早期终止密码子。

外显子 51 导致大约 13%的患者的肌营养不良蛋白表达的丧失。

这个基因编辑技术修复了来自细胞的诱导多能干细胞（iPS）和心肌细胞中的肌营养不良蛋白表达，并增加了心肌细胞的收缩力。

Cpf1 首先由张锋在麻省理工学院和哈佛大学研究所的团队发现，被确定为 CRISPR 的相关内切核酶。由于 Cpf1 小于 Cas9，因此更容易被装入到运载工具中，具有针对不同基因序列的潜力。

去年 12 月，专注基因编辑疗法的 Editas 医药公司（纳斯达克股票代码：EDIT）从 Broad 研究所授权获得了使用 Cpf1 进行 CRISPR 基因编辑的知识产权。

与此同时，西南大学的研究组还针对肌营养不良蛋白外显子 23，将 Cpf1 的基因编辑 CRISPR 指导 RNA 和校正的核苷酸模板注射入外显子 23 引起 DMD 无义突变的小鼠受精卵。

经过基因编辑的 24 只幼鼠中有 5 只的肌营养不良蛋白表达得以校正。这项技术恢复大多数肌肉纤维中的正常肌肉形态和肌营养不良蛋白表达，并增加肌肉力量。

虽然以前的研究已经表明，采用 Cas9 的 CRISPR 基因编辑可以跳过或纠正小鼠中的突变型肌营养不良蛋白，在新文章中，作者表明，使用 Cpf1 的 CRISPR 在小鼠的肌营养不良蛋白外显子 23 上具有相似的基因组编辑效率。