Roche 新型CD25抗体选择性清除调节性T细胞，增强抗肿瘤免疫

调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）维持免疫稳态，控制自身免疫性疾病发展，但同时也是肿瘤预后不良的重要因素，因而清除Treg成为抗肿瘤免疫的重要策略之一。CD25（IL-2Rα）是Treg膜表面特异性标志物之一，也是清除Treg的药物开发靶点。

Anti-CD25抗体药物

清除Treg细胞，需要借助anti-CD25抗体的Fc段，结合FcγR，通过抗体药物的ADCC和ADCP效应，裂解清除Treg。

之前已有两款CD25抗体药物上市，分别是罗氏于1997年推出了一款靶向CD25的抗体药物Zenapax（daclizumab，达利珠单抗），作为免疫抑制剂用于器官移植（主要是肾移植），但因销量不佳，该产品已于2009年正式退市。之后，Biogen开发的Zinbryta（高产工艺daclizumab），适应症是多发性硬化症(MS)的复发型成年患者，后因引起脑炎退市。

另外一款是Basiliximab（巴利昔单抗/舒莱）由Novartis开发，预防首次肾移植术后的急性器官排斥，国内已经上市（国内注册号：S20171040）。但是这两个抗体是阻断型抗体，不能通过ADCC清除Treg细胞，且抑制效应T细胞活化，因而不能用作肿瘤治疗。

Roche早期研发部创新中心，开发了一种新型非IL-2阻断型CD25抗体。他们将非阻断型IgM CD25抗体（克隆：7D4）的可变区，插入到具有清除Treg活性的克隆PC61（单纯的PC61有阻断IL-2的活性）中，共产生了43个候选分子。进而筛选到一个没有阻断活性，但是有ADCC活性的抗体：anti-CD25^{NIB（non-IL-2 blocking）}，命名为RG6292。

RG6292筛选（文献3）

RG6292活性

1.细胞学实验

1.1没有阻断活性

IL-2R阻断活性（文献3）

RG6292不阻断IL-2结合IL-2R，因而不影响信号通路蛋白STAT5的活性，不影响颗粒酶B和Ki67表达。Daclizumab是阻断型抗体，作为对照抗体，可见其基本阻断了IL-2R信号通路，STAT5活性基本归零，颗粒酶B和Ki67表达下降。因而RG6292不会影响CD4+，CD8+ T效应T细胞的活性。

1.2 选择性裂解Treg

Treg选择性裂解活性（文献3）

如图所示：RG6292对于Treg的裂解活性具有浓度依赖关系，但是对于CD4+T效应细胞和CD8+T效应细胞，只有极其微弱的裂解活性，且两个健康志愿者的数据接近。

2.动物实验

RG6292人源化荷瘤小鼠实验（文献3）

如图所示：人源化荷瘤小鼠，注射不同浓度抗体，血液，脾脏，肿瘤局部调节性T细胞（Treg）数量下降，且呈剂量依赖关系，在10mg kg^-1浓度下，Treg基本被完全清除。

同时通过颗粒酶B检测CD8+T细胞活性，显示抗体有激活CD8+T细胞的效应，也呈浓度依赖关系。

RG6292和CD25结合位点（文献3）

总结

对于肿瘤患者，调节性T细胞是抑制性免疫细胞，是病人预后不良的重要因素。因而通过ADCC效应清除Treg是一个很好的策略，之前已经上市的anti-CD25抗体（daclizumab和Basiliximab）只具有阻断IL-2R信号通路活性，因而不但不能清除Treg，反而会抑制效应T细胞活性，因而适应症为自身免疫和移植排斥反应。

RG6292开始实体瘤1期临床（Roche官网）

Roche开发的RG6292，可以通过ADCC清除Treg，而且对于IL-2R具有激动活性，增加颗粒酶B等效应分子表达，增强效应T细胞活性，理论上讲具有良好的抗肿瘤活性。从Roche官网更新的数据看，RG6292已经开始了实体瘤的1期临床，静待其临床结果。

参考文献

1. Vargas, F. A. et al. Fc-optimized anti-CD25 depletes tumor-infiltrating regulatory T cells and synergizes with PD-1 blockade to eradicate established tumors. Immunity 46, 577–586 (2017).

2. Kohm, A. P. & Miller, S. D. Response to comment on “Cutting edge: anti-CD25 monoclonal antibody injection results in the functional inactivation, not depletion, of CD4+ CD25+ T regulatory cells”. J. Immunol. 177, 2037–2038 (2006).

3. sabelle Solomon et al,CD25-Treg-depleting antibodies preserving IL-2 signaling on effector T cells enhance effector activation and antitumor immunityNat Cancer (2020). doi：10.1038/s43018-020-00133-0