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冠状病毒核酸检测假阴性的“救星“!--中国5G PCR PremiX

toroivd toroivd 2023-02-18


  

                                                                                                   

截止2020年2月7日冠状病毒确诊病例31211例,疑似病例26359例,并且每日逐渐增长的趋势。核酸检测试剂盒作为主要确诊的手段,目前供不应求。

可是目前因核酸检测试剂盒的快速上马,让试剂盒质参差不齐,使得产生很多假阴性。虽然假阴性会由采样不合理,运输和存储等造成病毒RNA降解,核酸提取质量差等原因造成。可是RT-qPCR核酸检测试剂盒的质量差是造成假阴性重要原因之一。


造成RT-qPCR核酸检测试剂盒的原因主要有两点:

1.PCR酶原料的扩增敏感度不够,仅能检测100copy以上。

2.PCR酶的抗抑制性差,不纯的核酸容易抑制PCR。




目前很多国内试剂盒还停留在十年前的水平,PCR酶采用的是热启动Taq酶系统,很多使用的是野生的Taq酶。的确Taq酶的生产技术很成熟,成本非常低,可是其敏感度很难达到100copies。另外Taq酶对提取不纯的RNA会产生PCR抑制,所以很容易产生假阴性。

天罗诊断(TOROIVD)采用其独特的“基于结构的酶分子设计及进化平台”,以Tth和Taq结构核心进化筛选出中国自主开发的“5G polymerase”,具有PCR,反转录,抗抑制,高灵敏,高特异性,超高速度五种目前PCR酶无法比拟的水平。另外结合“进化”的MMLV逆转录酶,宽泛的高温逆转录性能(50℃-60℃)。终于在2020年02月02日,开发出高速高性能的“TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Premix”,经客户测试及公司自测,性能超越TA,TB及TF三大国际品牌,是冠状病毒核酸检测假阴性的“救星”!

1极高的PCR扩增敏感度,3copies 也可稳定扩增。





评 价:相对与国内某些原料公司检测处于101左右的敏感度,提高了一个数量级;在PCR酶上敏感度上达到了国际顶尖水平。




2超越国际TA/TB品牌的最高性能的产品水平



评 价:

与以敏感度高为著称的TB公司相比,1.588及15.88copiesRNA水平,QPR-300明显有更强的扩增信号;具有更高的检出率。与市场上知名的TB品牌的产品比,QPR-300线性更好些,扩增效率更高(99.354%>89.442%),荧光信号更强及ct值更低。





3

高温活性MMLV的宽泛逆转录温度:50℃-60℃





评 价:采用50℃-60℃的Cq值波动范围仅仅1个Cq之内,均能在40左右检测到1.58copies的RNA。在此反转录温度下不仅具有MMLV的RT酶活性,5G polymerase的延伸活性及独有的RNaseH活性使得RT同时进行第二链DNA合成,大大增强了检测的敏感度。





4

非凡的抗抑制性,适合粗样品或直接RT-qPCR扩增


25%  EDTA血浆添加扩增ASFV实验

(蓝色:添加血浆,红色:未添加血浆)



评 价:

使用5G polymerase和OIE探针引物扩增ASFV的VP72基因,即使加到体系的25%EDTA血浆,依然正常扩增。注:该酶能耐受最高8mM Mg2+,当直扩时,为抵抗EDTA影响,需加提高Mg2+浓度。





5

高速及高特异,高速完成多重PCR

逆转录时间最低5min,可将ABI7500发挥到最快速度

专业模式最快条件:(变性:95℃,1秒;60℃, 20秒)

多重PCR最快条件:(变性:95℃,1秒;60℃, 31秒)


使用CFX96的最快PCR条件


四重PCR检测2019-nCoV

(ORF-1ab/N/E及内参基因)




评 价:我们采用“进化”的高速度RT酶及5G酶,使得我们能将ABI 7500及BioRad发挥到最大扩增速度;更适合高速PCR仪,使得RT-qPCR控制在30min左右。另外因抗体高特异封闭,使得容易进行四重PCR检测新型冠状病毒2019-nCoV



订购须知

产品型号:

QPR-300T  

TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR  5G Premix

规格:0.5ml×1管 

20ul反应体系50次


QPR-300 

TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR  5G Premix

规格:0.5ml×10管

20ul反应体系500次


QPR-300C  

TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR  5G Premix

规格:50ml×10管

20ul反应体系5万次



订购热线:

江浙沪地区:13701874942

北方地区:13661003776

南方地区:15001792609







天罗诊断公司

天罗诊断(TOROIVD)创立于2017年12月,是一家诊断酶库技术为核心持续创新的全球化品牌。企业愿景是建立全球最大的诊断酶库,通过不断筛选及改造新酶推动研究和临床诊断技术的快速发展。

天罗诊断核心团队由十几年酶诊断原料市场资深人士牵头,由华东理工酶工程专家及博士、美国佛蒙特大学和加州理工学院的酶分子设计海归人士、体外诊断产业资深人士及法规及管理体系专家组成。

天罗诊断通过酶库技术平台为分子诊断工业开发筛选新型酶原料,首要解决“中国诊断酶原料”被国外公司卡脖子的问题,同时将先进的酶原料推向全球市场。天罗诊断以市场需求为导向,利用酶库及配方库双重筛选平台,为客户提供诊断试剂盒生产和研发所需要的酶和解决方案。


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