早在2016年,《Nature》就发表了一篇名为“1,500 scientists lift the lid on reproducibility”的论文,文章公布了一项数据:More than 70% of researchers have tried and failed to reproduce another scientist's experiments, and more than half have failed to reproduce their own experiments,意思就是超过70%的科研工作者,在尝试重复另一位科学家的实验时以失败告终;超过50%的研究人员未能复制自己的实验。 由此可见,大部分的研究人员都面临着重复实验失败的结局!作为生物研究领域的我们,更是深知重复实验的“曲折”与“离奇”! 实验无法重复的同时还会带来毕业的困惑和导师的无奈,随着时间的推移,有的同学可能会变得抑郁失落,觉得自己什么都做不出来也做不好,长期以往必然会失去对科研的乐趣。然而,大多数的科研都是经过无数次和失败和踩坑才实现的,实验数据无法重复,也必然是有着多因素影响的。 为此,本期实验菌为大家盘点一下实验无法重复的影响因素,以便大家出现重复实验出现偏差进行分析~ (1)所配置试剂的新鲜程度以及厂家是否一样 以细胞培养为例,大家都知道培养基的好坏直接影响到细胞的生长环境。我们要对配置的试剂进行标注记录使用周期,以免出现因试剂问题影响实验结果;另外,不同厂家甚至不同批次都有可能会有一些偏差。以牛血清蛋白为例,有的厂家生产的就可以保存,有的却需要低温放置。有时候一点点pH的变化、重要底物的浓度微调都会极大的影响实验结果。因此,在保证操作正确的前提下,我们不妨从源头上分析影响因素~ (2)所用设备前后是否一致 就算是同一厂家生产的设备在不同机构进行的测试可能也难以保证实验数据的重复性。简单的离子,用PCR仪进行测试时,温度是重要参数,同样设定的60度,但可能会出现60.2度或59.6度,小差距大偏差可能就是由此引起的。因此,我们需要尽量保证前后使用设备的一致性。 (3)操作样品数量 对于常规生物实验,通常会采取n=3的实验方案,可能会导致测试样品数量非常多,但样品数量较多就难以保证所有样品都处于相同的实验。因此,对于数量众多的实验不妨分批次分组合理安排实验。 (4)其他 对于生物学实验,它的变量实在是太多了,比如试剂的浓度、反应的温度、培养的时间、微环境的pH等都会影响你的实验结果。但这些应该都是大家会注意到的变量,实验菌就不再啰嗦啦~ 总之,生物实验的操作对象都是肉眼无法看见的,稍微复杂的实验还是需要我们记录实验条件和时间节点以备不时之需!