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好消息!单细胞注释结果也可以在线绘图啦~ | 单细胞专题

运营部-GCL 联川生物 2022-06-07

基于marker基因的表达情况完成了各cluster细胞鉴定,代码小白后续如何基于细胞注释结果进行绘图呢?别着急,联川生物同步上线了基于细胞注释结果作图的云工具“10X单细胞数据分析-细胞鉴定结果分析”,该工具同时可以绘制细胞tSNE图,细胞基因表达热图,细胞基因表达小提琴图和细胞基因表达DotPlot图,且图片的展示方式也有很多种哦,发文章用它,用它,用它就对了!

云平台网址:https://www.lc-bio.cn/tool/ten_x/index?id=48

首先,该云工具都能绘制什么图片呢,我们先来一睹为快。该工具一共可以绘制以下四种图片,各细胞类别的tSNE映射图(这张图是单细胞文章中非常重要的图哦,一般放在文章的开始的部分)、细胞基因表达热图、细胞基因表达小提琴图、细胞基因表达DotPlot图(后面三种图,文章中出现的频率也是非常高,不仅可以直观看各marker基因在细胞中的表达差异情况还可以看出细胞鉴定的准确度)。选择合适的marker基因进行图形展示,助力您文章的快速发表。

与Marker基因可视化云工具异同点:

看了上面的图之后,您可能很疑惑,这里面的图除了热图好像跟Marker基因可视化(听说单细胞数据可以在线绘图啦!!!)云工具获得的图片很相似,我应该如何选择云工具呢?

首先,两个云工具的相同点

两个云工具使用的原始输入文件rData都是一致的(已经内嵌到您的项目路径下,直接选择需要分析的数据即可),两个云工具的基因表达小提琴图,基因表达DotPlot图以及各细胞/cluster类别的tSNE映射图也都是一样的。

不同点

1)两个云工具的目的不同:Marker基因可视化云工具是为了辅助细胞鉴定,基于各marker基因在cluster中的表达高低来定义细胞;细胞鉴定结果分析是在细胞鉴定之后,进行的图片调整,用于文章发表。
2)两个云工具的输入文件不同:Marker基因可视化云工具只需要输入marker基因列表即可;细胞鉴定结果分析既需要要输入marker基因列表同时还需要输入cluster对应的细胞注释列表。
3)两个云工具的图片部分功能不同:Marker基因可视化云工具可以绘制marker基因tSNE表达映射图,细胞鉴定结果分析可以绘制热图。

如何选择正确的云工具?

首先,如果您的细胞还未鉴定,请使用Marker基因可视化工具,如果已经鉴定使用细胞鉴定结果云工具。如果只是想做marker基因表达的tSNE图,请使用Marker基因可视化工具,同理,只想做cluster间的热图选择细胞鉴定结果云工具就可以了。你学会了吗?
接下来,我们来详细介绍下该云工具的用法:
作图数据选择界面

与Marker基因可视化云工具一样,只要您在我司做过单细胞项目且已经结题,您只需要选择相应的数据进行绘图就可以啦,无需上传庞大的作图文件哦!

工具界面

工具主要包含了左侧的功能选择界面、中间的参数调整和右侧的结果展示三大部分。其中,功能选择界面共包含介绍视频(视频详细介绍了每张图片作图细节的调整,带您快速上手)、细胞鉴定结果分析(作图及调整界面)、参考资料及分析方法等信息。

一键作图

作图开始之前我们需要先准备两个输入文件(可允许xlsx和txt两种格式的文件),分别是需要绘制的基因列表和cluster对应的细胞注释信息。
1)上传基因列表
该文件只有一列信息,GeneName一定要和您数据中的基因名完全一致,否则该基因将无法绘图。如果您不确定您数据中基因名是如何命名的,您可以在页面上直接进行搜索(如上右图),也可以直接上传,会自动根据您上传的基因进行基因名检查,如果有基因名不一致,会出现以下界面:
2)上传cluster注释表格
该文件包含两列信息,第一列为cluster信息,第二列为cluster对应的细胞信息,第二列细胞的输入顺序为后续热图,小提琴图,DotPlot图等作图的展示顺序。请注意,输入的cluster信息一定要跟您结果中包含的信息完全一致,不一致的情况上传时会出现右下图的报错信息(一旦出现该报错,将无法进行下游的分析,如果有些cluster不确定对应的注释信息,可以以cluster进行填充,后续绘图时将该cluster对应的细胞筛选掉即可):

温馨提示

由于细胞绘制跟您cluster注释表格上传的顺序有关,为了保证基因和细胞在热图中的对应关系,建议您在整理基因的表格时一类细胞的marker基因整理在一起,整体顺序按照细胞的顺序依次填写。
3)  开始分析
表格上传检查无误后,点击分析就可以啦~~由于单细胞数据量比较庞大,数据分析时间比较长,还请您耐心等待,分析完成后会自动跳转到细胞tSNE图界面。分析完成后,可以点击下载按钮,打包下载图片,如果对某一张图片不满意,再进行细节调整就可以啦~
4)作图细节调整
接下来,我们来看下各图片可以实现的功能,以下为部分功能图片展示,图片展示功能很强大,赶快来联川云平台用您的数据试试吧~~

细胞tSNE图

细胞tSNE图可以分样本绘制,筛选不需要的展示的细胞,调整配色方案,为不同的细胞类型加圈等多项功能,以上图片仅展示部分功能图片。

细胞基因表达热图

此外,还有细胞基因表达小提琴图和细胞基因表达DotPlot图,作图功能与Marker基因可视化对应的图片类型一致,这里不再赘述,您可以点击链接查看(听说单细胞数据可以在线绘图啦!!!)。

温馨提示

由于10x单细胞的数据量比较大,每调整一个参数图片都会实时加载,且随着细胞数量的增加加载的时间也会相应增加,调整图片的过程还请您耐心等待(此外,重要的事情说三遍:调图的过程中不能刷新页面,不能刷新页面,不能刷新页面)!
绘图参考文献:
Butler A , Hoffman P , Smibert P , et al. Integrating single-cell transcriptomic data across different conditions, technologies, and species[J]. Nature Biotechnology, 2018.

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