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单细胞悬液制备注意事项之灌注取样或裂红 单细胞知识微问答
利用10X Genomics和BD等单细胞平台进行后续细胞标记之前,如何对组织进行解离消化和制备成功的单细胞悬液需要有非常多的细节注意。
今天,就给大家带来制备单细胞悬液的注意事项之-:灌注取样或裂红
部分组织样本解离后,会有部分红细胞留存。当这些红细胞一起被捕获时, 会干扰靶细胞捕获预期计算值的精度。在我们的10×实验中,红细胞不属于特定组织的固有组成部分,因此往往不在我们靶标的范围内,故而减少红细胞的混入常常做为我们10×样本制备中的重要组成部分。针对红细胞的特性目前制备细胞悬液中主要采取“截源除异”的方法
①.截源:在取样时,通过灌注的方式清除血管中的血液后进行取样,因为人体保活的特殊性,这种方式主要针对造模动物组织。
②.除异:取样后及时清洗以清除血渍残留,再转入组织保存液中;在后续细胞悬液制备时,亦可通过红细胞裂解液(推荐使用美天旎Red Blood Cell Lysis Solution for 10X,货号:130-094-183)进行裂红处理,这种方式对人和造模动物组织都适用。
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