调节性T细胞治疗：自身免疫性疾病另一个治疗策略 | 免疫学专题
调节性T细胞作为体内重要的抑制性细胞群体，对于维持免疫环境稳态，意义重大。自然，也是炎症性疾病和自身免疫性疾病，移植排斥进行治疗的天然药物，已有多个临床项目在开展。
效应T细胞：活化后，分化成细胞毒性T细胞（CTL）通过颗粒酶，穿孔素等裂解靶细胞。
调节性T细胞：分泌IL-10，TGF-β等抑制性细胞因子，表达CTLA-4等抑制性受体，消耗IL-2等，抑制效应T细胞功能。
1.TCR工程
抗原特异性Treg比多克隆Treg能够更有效的抑制病理性T细胞功能。通常策略：将效应T细胞的抗原特异性TCR分离出来，转染入调节性T细胞。(Treg TCR，其天然亲和力和特异性可能比较弱，所以少用）。
2.CAR工程
CAR：通过胞外靶抗原单抗可变区（ScF）结合靶抗原，胞内CD3ζ和共刺激信号结构域，传递激活信号。
CAR的使用，拓宽了靶抗原的选择范围，不再局限于MHCI和MHCII类分子递呈的抗原。
此外，Treg发挥作用，很大程度依赖旁分泌的抑制性细胞因子，而无需直接接触细胞，这是Treg区别于经典效应性T细胞（Teff）的特征。因而CAR的靶蛋白可以选择炎症环境中的细胞外蛋白，而无需细胞膜蛋白，从而只将Treg吸引至炎症部位，降低了Treg可能存在的细胞毒性副作用（文献3）。
3.抗原特异性CD4T细胞异位表达FOXP3
在抗原特异性CD4+T细胞中异位表达FOXP3，将传统CD4+T细胞转换为Treg，已经证实，这个策略，可以抑制效应细胞因子的产生，产生抑制表型。但是这种策略产生的细胞不稳定，可能会产生一些中间表型，具有效应功能。
1.稳定性
Treg的可塑性
为了适应不同的环境，Treg展现出很强的可塑性（通过表达不同的转录因子，分化为不同的亚型）。一些研究显示，Treg可以丢失FOXP3或者FOXP3突变，丧失抑制表型，转化为致病性效应表型（文献5）。而针对表观遗传修饰的小分子（DNA甲基转移酶、组蛋白去乙酰化酶等），可以稳定Treg的遗传表型，需要进一步的临床和体内试验验证。
促炎症因子会破坏Treg的稳定性，如IL-6维持Treg/Th17稳态。高表达IL-6，会抑制TGF-β诱导的Treg分化。而针对IL-6受体的抗体药物，阻断IL-6的作用，则阻止向Th17分化，在自身免疫性疾病治疗中，有一定作用。因而基因敲除IL-6受体，或者STAT3，则有助于维持Treg的稳定性，但是IL-6信号作用广泛，敲除需谨慎。
IL-2维持Treg的存活
IL-2维持Treg细胞存活， 功能，稳定，因而低剂量注射IL-2，有助于维持Treg在体内的保留时间和功能（文献7），在一型糖尿病的临床实验中被使用（NCT02772679，T1DM Immunotherapy Using Polyclonal Tregs + IL-2 (TILT)）。但是IL-2对于所有T细胞亚型都存在活化效应，容易产生副作用。也有IL-2单抗-IL-2共价结合分子，开始临床前的研究，显示可以选择性扩增Treg。
2.调节Treg功能
IL-2对于Treg存活，功能很重要，但是IL-2也会激活其他T细胞亚型。因而可以在Treg工程表达突变的IL-2Rβ，再用突变的IL-2去维持Treg的功能，则可以避免这一问题。
3.靶向组织迁移
直接注射，对于很多自身免疫性疾病不是很便利。因而可以通过工程入特定的趋化因子受体，以及针对病变区域组织特异性抗原的CAR，实现组织靶向迁移。
4.安全性
因为Treg也存在不稳定，可能转化成效应T细胞的可能性，因而同样需要考虑其安全性问题。
自杀装置
工程表达非全长EGFR（tEGFR）和CAR，可以通过EGFR的抗体药物cetuximab（西妥昔单抗）清除。
RQR8基因，表达结合CD20表位，可以通过CD20抗体rituximab清除。
分子开关（CaspaCIDe（Bellicum Pharmaceuticals开发））和CAR一起工程表达在Treg。CaspaCIDe包含Caspase9的CID结合结构域和信号结构域，通过rimiducid可以诱导细胞凋亡。
整合位点
使用病毒转基因工程技术，和染色体的随机整合，可能有潜在致癌风险。使用CRISPR–Cas9特定位点整合，可能在一定程度解决这个问题。
通用型细胞治疗增加治疗可及性，生产标准化，质量易表征等特定，是每一类细胞治疗的发展方向，Treg也一样。
通过干细胞重编程，加基因编辑技术，通过iPS细胞，生产表达一系列受体的工程Treg，是未来研究的重点，也是细胞治疗在更广泛人群使用必经之路。
主要参考文献
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