【非瘟讲堂/第四堂】非洲猪瘟科学采样系列之环境、人员、物资篇

邦博士

Dr.YEBIO

在非洲猪瘟防控过程中，非洲猪瘟感染猪只的早期发现及确诊工作与猪只采样工作的科学性密不可分，关于猪只科学采样已在往期中做详细描述。非洲猪瘟的采样工作覆盖范围广，除了猪只采样外，猪场环境、物资、人员等非猪只的科学采样对非洲猪瘟的防控亦发挥重要作用，它们不仅是防止病毒传入猪场工作的关键环节，也是猪场实现精准剔除及后期复养工作的前提条件。

邦博士说

因此非洲猪瘟日常监测工作，除了猪群要科学采样外，人员、物料及环境的合理采样也具有重要价值，下表1是推荐的相应采样方法。

表1 采样方法推荐表

本篇为非猪只采样篇，介绍6种猪场常见的非猪只采样方法，分别为人员采样、物资采样、饲料采样、水样采样、车辆采样及环境采样，具体准备工作及操作方法见下：

必需物品套装

一次性隔离服、雨靴、一次性PE手套、一次性鞋套、一次性口罩、自封袋、75%酒精消毒棉球或碘伏等消毒液、信息登记表、记号笔、冰袋、保温箱。

一

人员采样操作SOP

（一）物品准备

必需物品套装、无菌纱布、生理盐水。

（二）具体步骤

1	准备工作：采样前根据采样目的制定采样方案和路线，带足所需物品，减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴，先佩戴一次性乳胶手套后，再戴一次性PE手套，以便及时更换，然后对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样；
2	将无菌纱布使用无菌生理盐水充分浸湿，由被采样人员自行使用无菌纱布擦拭头发、面部、手部、颈部、腕部、指甲缝、衣物表面、鞋面/底及手机表面，每个部位擦拭10秒左右，采集后将纱布放回自封袋密封，在自封袋上写好姓名、日期，1人1袋为1个PCR样品；
3	检测人员将液体挤出到离心管，每一个人的样品为1个PCR样，处理、检测；
4	记录送检：在离心管表面做好信息记录，相应信息做好登记，冷藏保存尽快送检；
5	废物处理：每次采样后立即更换手套，避免交叉污染，废弃物品及时无害化处理。

二

物资采样操作SOP

（一）物品准备

必需物品套装、无菌纱布、核酸保护液。

（二）具体步骤

1	准备工作：采样前根据采样目的制定采样方案和路线，带足所需物品，减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴，先佩戴一次性乳胶手套后，再戴一次性PE手套，以便及时更换，然后对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样；
2	密封袋中提前装入10~15ml核酸保护液，将无菌纱布放入袋中充分浸湿；
3	采样人员取出纱布以箱或捆为单位擦拭外包装，擦拭后放回密封袋中为1个PCR样品；
4	拆除外包装后，以箱或捆为单位，用浸湿的无菌纱布擦拭箱内物品表面，擦拭后放回密封袋中为1个PCR样品；
5	记录送检：在密封袋表面做好信息记录，相应信息做好登记，冷藏保存尽快送检；
6	废物处理：每次采样后立即更换手套，避免交叉污染，废弃物品及时无害化处理。

三

饲料采样操作SOP

（一）物品准备

必需物品套装、一次性长臂手套、无菌纱布、核酸保护液。

（二）具体步骤

1	准备工作：采样前根据采样目的制定采样方案和路线，带足所需物品，减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴，先佩戴一次性乳胶手套后，再戴一次性长臂手套，以便及时更换，然后对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样；
2	密封袋中提前装入10~15ml核酸保护液，将无菌纱布放入袋中充分浸湿；
3	对散装饲料打料车下料口、料塔底端下料口或自配料打料机出料口用浸润的纱布均匀擦拭下料口内壁，擦拭后放回密封袋中，每个料口为1个PCR样品；
4	记录送检：在密封袋表面做好信息记录，相应信息做好登记，冷藏保存尽快送检；
5	废物处理：每次采样后立即更换手套，避免交叉污染，废弃物品及时无害化处理。

四

水样采样操作SOP

（一）物品准备

必需物品套装、20ml收集管、打火机。

（二）具体步骤

1	准备工作：采样前根据采样目的制定采样方案和路线，带足所需物品，减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴，先佩戴一次性乳胶手套后，再戴一次性长臂手套，以便及时更换，然后对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样；
2	水线取样：先用75%酒精棉球对取水口(水龙头、饮水器等)擦拭，并灼烧取水口10~20秒，待放水30~40秒左右后，取水样10ml左右，拧紧盖口；
3	蓄水池取样：用取水器在距离水面0~20cm水层取水10ml左右；
4	记录送检：在收集管表面做好信息记录，相应信息做好登记，冷藏保存尽快送检；
5	废物处理：每次采样后立即更换手套，避免交叉污染，废弃物品及时无害化处理。

五

车辆采样操作SOP

（一）物品准备

必需物品套装、无菌纱布、核酸保护液。

（二）具体步骤

1	准备工作：采样前根据采样目的制定采样方案和路线，带足所需物品，减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴，先佩戴一次性乳胶手套后，再戴一次性长臂手套，以便及时更换，然后对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样；
2	密封袋中提前装入15~20ml核酸保护液，将无菌纱布放入袋中充分浸湿；
3	对车辆轮胎及底盘擦拭为1个PCR样品，对车身包括车门、车厢外表面、车头保险杠及车尾对接处擦拭为1个PCR样品，对驾驶室方向盘、脚踏板等全方位擦拭为1个PCR样品，对整个箱体内全方位擦拭为1个PCR样品；司机1个PCR样品；
4	记录送检：在收集管表面做好信息记录，相应信息做好登记，冷藏保存尽快送检；
5	废物处理：每次采样后立即更换手套，避免交叉污染，废弃物品及时无害化处理。

六

环境采样操作SOP

（一）物品准备

必需物品套装、无菌棉拭子或无菌纱布、核酸保护液。

（二）具体步骤

1	准备工作：采样前根据采样目的制定采样方案和路线，带足所需物品，减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴，先佩戴一次性乳胶手套后，再戴一次性长臂手套，以便及时更换，然后对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样；
2	栏舍环境采样重点区域为风机口、死猪转运车、料线外表面、饮水器、料槽、栏舍门把手、墙面、重要过道、栏具及公共设施；外部环境采样重点区域为生活区、厨房、出猪台、重要道路、公用设施；每个区域可设置5个采样点，每个点用1块无菌纱布，密封袋中提前装入15~20ml核酸保护液，将无菌纱布放入袋中充分浸湿，反复擦拭采样点；
3	将每个区域5块纱布集中置于1个密封袋中，为1个PCR样品；
4	记录送检：在收集管表面做好信息记录，相应信息做好登记，冷藏保存尽快送检；
5	废物处理：每次采样后立即更换手套，避免交叉污染，废弃物品及时无害化处理。

非猪只采样注意事项：

1	每个采样点样本可单检，但若混合检测，混合样本数≤5份；
2	不同车辆、人员及采样区域采样后立即更换手套、脚套、防护服等一次性用品，避免交叉污染。

以上为非猪只采样的准备工作、具体操作步骤及相关注意事项。针对猪场环境、车辆、人员及物资等除选择科学的采样方法外，更需严格限制流通，并进行有效消毒。

部分图片：已取得新媒体商用授权

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