高考探究——生物技术实践 突破策略
生物技术实践 答题策略
一、考察内容
1.[2018浙江11月选考,32(一),7分]回答与微生物培养及应用有关的问题:
(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时,灭菌时间应从达到设定的温度或压力值 时开始计时。对于不耐热的液体培养基,一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中,采用抽滤方式可较快地进行过滤灭菌。
(2)与酿造果醋相比,利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋,需增加淀粉转化为糖的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中甘露醇的主要作用是提供碳源 。
(3)为筛选胞外α-淀粉酶分泌型菌种,一般从 C (A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C.米酒厂周围 D.枯树周围)获得土样,用无菌水稀释,涂布到含有淀粉的选择培养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在菌落周围观察到水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个 水解圈与菌落直径 比值大的菌落,分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心,取 上清液 用于检测酶活性。
2.2019年4月32．加试题（14分）回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与果胶和果胶酶有关的问题：
（1）通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为 。
（2）为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行 。
（3）在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使 。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入 使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
（4）常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有 和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有 和 。
3. 2020年1月浙江高考(一)回答与泡菜制作有关的问题:
(1)用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生___________，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是_________________。
(2)泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使____________菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使___________菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。
(3)从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后，取滤液进行________________，再用________________的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有________________，以便于观察是否产酸。
(4)自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加________。
答案：（一） (1)果胶酶 细胞破裂，细胞内营养物质外流使乳酸菌快速地获得营养物质(2)喜好氧的 不耐酸的(3)稀择 涂布分离 酸碱指示剂（4)乙醇 (二) (1)过滤灭菌 染色法，渗透吸水失水(2)化学合成 两种限制性核酸内切酶 扩增 (3)细胞壁 胚胎发生
考向1：灭菌、培养基配制、仪器的使用方法
例如，2016年10月：LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取液、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解,再加琼脂,灭菌备用。(2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液,用高压蒸汽灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤,因为G6玻璃砂漏斗孔径小，细菌不能透过 ,故用于过滤除菌,然后将尿素溶液加到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用；2018年11月(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时,灭菌时间应从达到设定的温度或压力值时开始计时。对于不耐热的液体培养基,一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中,采用抽滤方式可较快地进行过滤灭菌；另外玻璃刮刀、接种环、摇床、磁力搅拌器、封口膜、取样器（俗称移液枪）、超净台灭菌等使用方法也是考试范围。
考向2：微生物筛选采样：
采样的地点就是微生物生活的相应环境中采样.如，教材中从哺乳动物排泄物的地方获得分泌脲酶的细菌；2019高考，从腐烂的水果上获得产生果胶酶的微生物；2018高考，为筛选胞外α-淀粉酶分泌型菌种,一般从米酒厂周围采样；还如要获得产生耐高温的酶，往往从高温环境处选择相应的微生物。
考向3: 筛选目的微生物及相关酶活性检测
即从多种微生物中分离出单菌落，然后进行鉴定菌落的特征，然后进行扩大培养、离心后进行相关酶活性的检测。酶又分为胞外酶和胞内酶，若是胞内酶需裂解微生物，若是胞外酶则取上清液进行检测。例如：2018年11月，获得土样,用无菌水稀释,涂布到含有淀粉的选择培养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在菌落周围观察到水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个水解圈直径与菌落直径比值大的菌落,分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心,取上清液 用于检测酶活性；2019年4月（2）为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行单菌落分离 ；2020年1月(3)从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后，取滤液进行 稀释_，再用涂布分离的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有酸碱指示剂，以便于观察是否产酸。(4)自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加乙醇。
考向4：结合教材及题目信息分析相关知识
这个考向要强调一点是，在这一类型的题目中，需要结合前后文分析。例如，2018年(2)与酿造果醋相比,利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋,需增加将淀粉分解为葡萄糖（分析题目信息）的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中甘露醇的主要作用是 作为碳源（教材知识） 。2019年4月（3）在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使 水果组织疏松及细胞受损（教材知识） 。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入乙醇（教材知识）使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。2020年1月(2)泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使喜好氧的 菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使不耐酸的菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。
三、问卷星测试