CAR-T背后的英雄，慢病毒载体生产工艺剖析 | 医麦课堂
★博腾生物GMP悬浮无血清慢病毒生产平台，助力基因与细胞治疗丨医麦猛爆料★AAV大牛James Wilson领衔研究，一次基因编辑治疗成功降低动物模型三年的胆固醇丨医麦猛爆料
2021年3月1日/医麦客新闻 eMedClub News/--近年来，CAR-T细胞疗法在快速崛起，但有很多环节仍需要完善。目前 CAR-T细胞疗法主要面临着两大问题：难以规模化、成本高。因此，降低生产成本、实现大规模生产、缩短生产周期等对于CAR-T的普及有很重要的现实意义。CAR-T的基因递送载体作为CAR-T技术的核心环节，其生产及质量控制也对CAR-T疗法有着极其重要的影响。
CAR-T工艺流程概述
自体CAR-T的制备过程包括一些基本的步骤。首先患者的白细胞（WBCs）通过血细胞去除法分离后洗涤获得。然后，T细胞被激活，转导CAR基因，扩增到一定数量后灌装和密封后用于治疗。经过一定质控，患者经过预处理后，将CAR-T细胞注射到患者体内。
用于将CAR转导进T细胞的病毒载体，被认为是CAR-T细胞生产过程中的关键原材料。最终的CAR-T细胞产品需“个体化”来自于每个患者，但编码CAR的病毒载体可以大量地生产，并在-80℃长时间储存。CAR-T细胞生产和其载体的生产均需在GMP车间内进行。
目前，CAR-T细胞的制备，大多数情况下由慢病毒或γ逆转录病毒作为载体。吉利德（Kite）的Yescarta和Tecartus采用了灭活的逆转录病毒载体，而诺华的Kymriah以及Juno的Breyanzi是依靠灭活的慢病毒载体完成CAR-T细胞制造的。
无血清悬浮培养可降低成本和污染风险
慢病毒无血清悬浮制备技术可以很大程度上降低成本并降低污染风险。成本方面，在制备慢病毒环节需要大量、高质量的细胞，在传统技术平台中这些细胞的培养需要进口血清。目前进口血清价格高昂且一直在上涨，这是成本中不可忽略的因素。然而，用来源和化学成分非常清晰的原料，代替血清为宿主细胞提供营养，也是一个很好的选择。血清代替物培养的细胞，其繁殖能力和生长能力等参数与血清培养的细胞相当，但成本降低了很多。
另一方面，悬浮技术可以让慢病毒体系更容易放大。在传统技术中，宿主细胞只能贴壁培养。在需要大规模培养的情况下，这样的技术就非常耗时、耗力。但在悬浮培养条件下，利用生物反应器，可以在一个相对很小的空间内实现大规模、高密度的细胞培养和慢病毒的生产，这对实现规模化和成本降低都有很大的意义。
常用的慢病毒生产细胞有393T、293FT 、293SF-3F6，这些细胞可以在没有贴壁载体的情况下迅速悬浮生长，这使得它们比贴壁培养更容易培养及生产。无血清培养基较为适合临床样品的生产，它可以降低被外源物质污染的风险。如若生产中加入了血清，则需要将外源性病毒列入慢病毒的质控体系中。
医麦课堂携手专注于细胞与基因治疗CRO+CDMO公司——博腾生物，将在3月10日上线一场主题为“慢病毒无血清悬浮工艺助力细胞药物开发”的线上直播课程，届时欢迎各位在线交流学习！
医麦课堂
直播题目：慢病毒无血清悬浮工艺助力细胞药物开发
直播时间：2021年3月10日晚8点-9点
内容简介：传统的病毒生产工艺流程；病毒生产的成本，工艺控制，参考标准；提高慢病毒载体生产稳定性和生产放大；悬浮无血清病毒生产工艺深入解读；悬浮无血清病毒生产工艺的优势；悬浮无血清慢病毒生产案例分析。
分享形式：45min嘉宾分享+15min观众互动
内容精彩，敬请报名参加！
注：请扫描直播二维码报名
授课专家
博腾生物副总经理
第一军医大学内科学博士，免疫学博士后。曾在通用电气等多家公司担任高层管理岗位，主持负责多个Car-T项目IND申报；曾领导1.1类创新药物进入2期临床试验。在T-cell 平台开发、CAR-T工艺开发及生产等方面有丰富的经验，现任博腾生物副总经理。
温馨提示
1、直播开始前会有短信提醒或者邮件提醒，请报名的时候务必填写正确的手机号码及邮箱地址。
2、开课后2-3个工作日内会上传本节课的视频回放，报名后回放视频不限时观看。
3、课程内容总结将发布在「医麦客」订阅号 ( 微信号：eMedClub)，更多课程预告也会及时发布，不想错过的小伙伴请快快关注~
医麦课堂
为助力中国生物医药产业人才成长，医麦客特隆重推出“医麦课堂”栏目，诚邀生物医药行业内资深权威的大咖专家，聚焦新药研发过程中的各类问题，为广大医药产业人才提供即时即看即学的精彩课程。目前已推出二十余期，在线浏览人次3.5W+，深受好评！
参考资料：
1.Poorebrahim M, Sadeghi S, Fakhr E,et，al. Production of CAR T-cells by GMP-grade lentiviral vectors: latest advances and future prospects.Crit Rev Clin Lab Sci. 2019 Sep;56(6):393-419.
2.B.L.Levine, J.Miskin, L.Wonnacott, et al., Global Manufacturing of CAR T Cell Therapy. Molecular Therapy:Methods & Clinical Development, 2017, 4:92-101.