SOP文件 | 抗酸染色标准操作规程

1 目的

规范抗酸染色标准操作规程。

2 原理

抗酸菌具有耐受酸件介质脱色的生物性状，此类细菌在石炭酸(苯酚)的协同作用下．被复红染色剂着色，能够耐受酸性酒精脱色，显微镜观察时保持紫红色；而其他脱落细胞或标本中的非抗酸菌被酸性洒精脱色，可被复染剂亚甲蓝染为蓝色。

3 试剂

3.1 石碳酸复红溶液

3.2 酸性酒精溶液

3.3 亚甲基蓝溶液       

4 质控

每天用龟分枝杆菌ATCC 93326做阳性对照，大肠埃希菌ATCC 25922做阴性对照。

5 操作步骤

5.1 初染：滴加石碳酸复红溶液盖满玻片，染色5分钟或更久。（不需加温步骤）

5.2 脱色：自痰膜上端外缘滴加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色（1-2）分钟；如有必要，需流水洗去酸性酒精溶液后，再次脱色至痰膜无可视红色为止。

5.3 复染：滴加亚甲基蓝溶液，染色30秒。

6 结果判断

抗酸杆菌呈红色。

7 注意事项

7.1 每张玻片只能涂一份标本，禁止将2份或2份以上的标本涂在同一张载玻片上。

7.2在涂抹痰标本时，严禁对载玻片进行加热。

8 临床意义

只针对用于结核病、麻风病等的细菌检查，初步诊断。

9 安全防护措施

9.1 操作人员要戴口罩、手套和穿隔离衣。

9.2 涂片制备：痰标本要高压灭菌或者在标本中加入等量0.5％“84”消毒液（含有效氯2500mg/L）后涂片。气管刷检送检的玻片，或者对于进行抗酸染色的痰标本(因使用的容器原因不能高压灭菌)，紫外线灯下照射30分钟进行染色镜检。

9.3 镜检后的玻片均浸泡在含有效氯1 000mg/L的消毒液中，高压灭菌后处理。

9.4 所有标本、污染物丢弃之前，都需经高压灭菌、焚烧或浸泡杀菌剂中。

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