SOP文件 | 嗜酸性粒细胞手工计数法操作规程及临床意义

检测原理：

血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。

目的：协助某些疾病的诊断、疗效观察及预后。

试剂：

乙醇-伊红稀释液

90%乙醇      30ml     

甘油         10ml  

碳酸钾       1g  

枸橼酸钠      0.5g    

20g/L伊红液    10ml     

蒸馏水加至100ml，本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含10%甘油，比较粘稠，细胞不易混匀，故计数前必须充分振摇。

操作：

小试管中加稀释液0.38ml。

常法取梢血20ul，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。

静置3-5min，用低倍镜（必要时用高倍镜）镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。

计算：

10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20×10⁶ =嗜酸性粒细胞/L

参 考 值：

（50-300）×10⁶/L（50-300/ul） 

附注：

1、血液稀释后应于lh内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被坏，结果偏低或不易辨认。

2、充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要适当延长混匀时间。

3、注意与中性粒细胞区别以免误认。中性粒细胞一般不着色，但也有着浅红色的，其颗粒较小。

住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。

用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。

临床意义：

1、直接计数主要用观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上腺皮质功能。

2、其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。

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