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DNA片段扩增(PCR)及电泳鉴定(实操视频)
1.提取RNA的话所有的所有的试剂和耗材都要用DEPC(焦碳酸二乙酯)做RNase free处理,然后在裂解缓冲液中加入DNase,其他提取步骤与DNA提取基本相同。
2.PCR试剂的量太少,我只顾得上看试剂加没加进去,没顾得上对焦,请多包涵。
3.体内DNA复制的引物是RNA,而PCR的引物是单链DNA,比RNA稍微稳定点。
4.PCR刚发明的时候用的是不耐热的大肠杆菌聚合酶,每次变性退火后要重新加,非常麻烦,1988年才把taq酶应用到了PCR反应中。
5.酶的半衰期指的是酶活力从初始活力降到一半的时长,简单的说就是酶会逐渐失活。
6.前沿指示剂除了深蓝色的溴酚蓝(指示600bp DNA片段)以外,主流的还有视频中浅蓝色的二甲苯腈蓝FF(指示2kb的DNA片段),Marker里那绿色的不知道是什么。
7.如果犯罪嫌疑人是女性可以通过扩增比对线粒体基因,溯源找到其家族,但无法确定姓氏,比较麻烦。
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