​检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的机理和其他简易方法

1 检测生物组织中糖类的其他简易方法

①Molisch反应（α-荼酚反应）

此方法是鉴定糖类最常用的颜色反应。它的原理是：糖类在浓硫酸作用下所形成的糠醛及其衍生物可以与α-萘酚作用，形成紫红色复合物。由于在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫红色的环，因此又称紫环反应。α-萘酚也可用麝香草酚或其他的苯酚化合物代替，麝香草酚溶液比较稳定，其灵敏度与α-蔡酚一样。除了糖类之外，各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等都可以呈现近似的阳性反应。因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应能说明有糖类存在的可能。

②蒽酮反应

糖类经浓酸水解，脱水生成的糠醛及其衍生物与蒽酮（10-酮-9，10-二氢蔥）反应生成蓝绿色复合物。

③Benedict反应

班氏试剂是斐林试剂的改良（也是含有Cu²⁺的碱性溶液），能使具有自由醛基或酮基的糖类氧化，其本身则变成砖红色或黄色的Cu­₂O，可用来测定还原糖的存在。它利用柠檬酸作为Cu²⁺的络合剂，其碱性比斐林试剂弱，灵敏度高，干扰因素少，因而在实际应用中有更多的优点。

④Bial反应（甲基间苯二酚反应）

戊糖与浓盐酸加热形成糠醛，在有Fe³⁺存在的条件下，它与甲基间苯二酚（地衣酚）缩合，形成深蓝色的沉淀物（此沉淀物溶于正丁醇）。己糖也能发生反应，产生灰绿色甚至棕色的沉淀物。

2 检测生物组织中脂肪的其他简易方法

①油点试验（spot test）

将含有脂肪的混合物磨碎后擦在一片滤纸（或牛皮纸）上，然后朝向光源观看，应该有半透明的油点出现。此油点不能挥发掉。当滤纸浸过苯（或醚、异丙醇等）后，油点消失。或将混合物磨碎后溶于苯液中，然后过滤。取一滤纸放人滤液中，取出后让苯挥发，朝向光源观看，如有半透明油点存在，则证明混合物中含有脂肪。

②乳液形成试验（emulsion test）

将含有脂肪的混合物溶液稍微加热，加入少量乙醇，摇匀后；静置。脂肪可分散成许多微粒，形成白色乳状液。

3 检测生物组织中蛋白质的其他简易方法

对各种氨基酸特异的某些颜色反应（见表2-2），可用来检测含有这些氨基酸的蛋白质。这些颜色反应包括Millon反应、黄蛋白反应、茚三酮反应以及Hopkins-Cole（水合乙醛酸）反应等。

①Millon反应

米伦试剂为硝酸、亚硝酸、硝酸汞、亚硝酸求的混合物，能与单酚、双酚和吲哚衍生物产生颜色反应，但不能检验尿蛋白。

②茚三酮反应

蛋白质、多肽和各种氨基酸具有茚三酮反应。除无α-氨基的脯氨酸和羟脯氨酸呈黄色外，其他氨基酸生成紫红色，最终为蓝色化合物。

③黄蛋白反应

它是含有芳香族氨基酸，特别是酪氨酸和色氨酸的蛋白质所特有的颜色反应。

表2-2部分氨基酸的颜色反应

来源：新教材必修1教师用书

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