火视200|液体活检的全能选手！QIAGEN全方位为您揭开肿瘤君的真面目！

火石在线：firestone-link
洞悉全球医健创新创业实践

摘要

液体活检是一个激动人心的新领域，同时也是QIAGEN公司的核心领域。该公司开发用于处理源自患者体液的肿瘤DNA和RNA的新颖解决方案，从液体活检的各个层面对肿瘤进行监测，可谓是液体活检的“全能选手”。

公司简介

QIAGEN是荷兰人控股的一家专业化致力于生物分子样品制备解决方案的跨国经营企业，成立于1984年，总部位于德国。QIAGEN提供的产品超过500类，包括各种试剂、耗材和自动化纯化工作站。这些产品用于样品采集、稳定、核酸或蛋白的分离、纯化和检测中，不仅广泛的应用于科研领域的各个方面，在生物技术、制药、法医研究、食品安全检测、畜牧业和分子诊断领域也得到了广泛的应用。

核心技术和产品

在QIAGEN的众多技术和产品中，液体活检是其核心领域。而且，不同与其它专注于液体活检的公司，QIAGEN的技术包含液体活检的全部三个标志物，即循环肿瘤细胞(CTC)、循环肿瘤DNA(ctDNA)和外泌体(exosome)。

1目标一：ctDNA

QIAGEN的QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit是游离核酸提取的得力工具。它从人类血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA，可从含低浓度DNA和RNA碎片的原始样本（人血浆中常规游离DNA的浓度为1–100 ng/ml）中纯化和浓缩游离的DNA、RNA、miRNA，包括病毒核酸。起始样本体积至多5 ml。

优势：

• 浓缩的核酸，高上样量，低洗脱体积

• 高效回收DNA和RNA碎片

• 无需有机提取或乙醇沉淀

• 完全去除污染物和抑制剂

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

2目标二：CTC

QIAGEN 的单细胞全基因组/ 全转录组扩增方案可以轻松跨过样本量低的限制，深度解析CTC内隐藏的信息：

REPLI-g Single Cell Kit：采用改良的MDA技术对单个细胞进行全基因组无偏差扩增，高度适合NGS分析。

REPLI-g WTA Single Cell Kit：用于对从单个细胞中得到的RNA或mRNA进行无偏差的全转录组扩增。

REPLI-g Cell WGA & WTA Kit：用于对少量细胞同时进行全基因组/全转录组扩增。

3目标三：外泌体

QIAGEN的exoRNeasy Serum/Plasma Kits采用Exosome Diagnostics公司的技术，取代了传统的超速离心进行外泌体分离的方法，通过离心柱和特制缓冲液，快速从血清/血浆中分离外泌体，之后使用QIAGEN特有的高效技术分离包含miRNA在内的总RNA。整个实验流程，从血清/血浆样本到RNA产物，只需1小时。

领导团队

在这些光彩夺目的成绩背后，QIAGEN有一个坚实的领导团队。Peer M. Schatz作为公司CEO，于1993年加入了QIAGEN并成为了公司管理层的一员。多年领导和打拼之下，QIAGEN从20年前那个只有30名员工的小公司，成为了有4000余名雇员、200多万美元收益的基因组领域执牛耳者。

Peer M. Schatz

Schatz在医疗商业领域具有夺目的履历。他曾在瑞士圣加仑大学获得商业与社会科学学位，并在美国芝加哥大学Booth商学院攻读了MBA学位。在加入QIAGEN之前，Schatz在Sandoz AG和Computerland等公司担任职务，并曾于北美和欧洲的计算机和软件贸易领域创业打拼。

融资情况

QIAGEN于1996年上市，并于2008年至2013年期间相继收购了包括Corbett Life Science、SABiosciences，ESE GmbH等5家生物制药和医疗科技公司。值得一提的是，QIAGEN在2011年对QuantiFERON的收购为公司的研发领域注入了强大的力量，这家科技公司具有在疾病早期就诊断出诸多疾病的不俗能力。而QIAGEN对于法国公司Ipsogen主要股权的掌控也意味着它获得了一系列血癌检测资源。

公司名称：QIAGEN

公司地址：荷兰，文洛

公司网址：https://www.qiagen.com  

融资情况：1996年6月上市，相继收购了5家公司

公司团队：CEO-Peer M. Schatz

【版权声明】本文版权为火石创造及/或相关权利人所有。未经许可，禁止转载、摘录、复制或建立镜像等侵权行为。如需合作，请联系：[e-mail]。

火视观点

CTC富集（分离）液体活检的关键步骤，对后期的CTC应用起到非常关键的作用。本期火视回顾下CTC富集及分离方法：

• 免疫亲和法

建立在免疫亲和原理上的CTC富集方法，利用特异性抗体与细胞表面抗原进行特异性结合来富集CTC。

1、免疫磁珠法：以CellSearch法为代表，在磁珠上包被细胞表面粘附分子EpCAM，来捕获CTC。临床研究证明，该方法检测出的CTC数目与肿瘤的预后密切相关。FDA已批准CellSearch检测的CTC数目用于预测转移性乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌的预后。

2、微流体法：Nagrath和Toner的团队研发了一种用于捕获CTC的微流体。上面有78000个微柱与EpCAM的抗体相结合，可直接捕获全血中的CTC。整个微流体共有970 mm2的表面积，在2mL/hour的通量下，CTC捕获效率>60%，特异性在50%左右。在多种转移肿瘤中，该方法已被证明有较高的CTC捕获效率。

3、纳米结构基体：Wang et al等人将EpCAM抗体结合在硅质的纳米基体上，进行CTC捕获，在1mL/hour的通量下，可以达到95%以上的捕获效率。一项研究利用该方法对26例前列腺癌进行检测，CTC的检出率为20/26，明显高于CellSearch系统（8/26）。

4、微量离心管：由Hughes et al研制，在微量离心管上包被EpCAM及PSMA的抗体，在4.8mL/hour的通量下，捕获率可达50%，特异性达66%。用该方法对14例转移性肿瘤患者进行CTC检测，检出率为100%，明显高于CellSearch系统（9/14）。

5、体内富集：将结合EpCAM的装置从前臂静脉插入病人体内，并停留30分钟，从而进行体内CTC富集。临床实验证明，这种方法对乳腺癌和肺癌的CTC细胞均有较高的捕获效率。

6、白细胞去除法：属于阴性富集法。用特异性抗体CD45、CD14等与白细胞结合，从而去除全血中的白细胞。该方法比其它富集方法捕获效率更高，但特异性明显低于其它方法。

• 物理特性富集法

依据CTC的物理特性，如密度、大小、可变形性及表面电荷等进行富集。

1、密度梯度离心：非常廉价高效的CTC分离方法，可将CTC与白细胞和红细胞分离。目前市场上有较多的依赖密度梯度离心进行CTC富集的试剂盒。临床实验证明，密度梯度离心富集CTC比CellSearch系统效率更高。

2、微孔过滤：依据CTC体积大于血细胞的特性，对CTC进行捕获。该技术已在转移性肝癌、肺癌、前列腺癌、黑色素瘤等肿瘤中被证明有效。捕获效率高于CellSearch系统。

3、微流控芯片：最初由Tan和 Lim团队研发，针对CTC的体积和可变形性，CTC的捕获率和特异性均可达到80%以上。在Tan和 Lim研究的基础上，研究者们又发展了不少改进型的微流控芯片。

4、介电电流：由于CTC与血细胞所携带的电荷不同，在双向电泳的条件下，可将CTC有效捕获（95%）。目前该技术主要对细胞株进行研究，临床标本的研究相对较少。

相关内容推荐：点击文字即可阅读

↓↓↓点击"阅读原文"

参加“首届国际心血管技术和产业创新峰会”

点赞是种态度，转发是以思想和朋友进行对话