【技术知识】微滴式数字PCR（ddPCR）原理与应用简介

引言

ddPCR（Droplet digital PCR）是在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。

相比传统PCR，ddPCR技术不依赖Ct值或内参基因，即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目，让数字PCR成本更低，且更实用。ddPCR技术适合于拷贝数变异研究、复杂来源样品中含量极低核酸分子的检测、NGS数据验证、NGS测序文库的鉴定、miRNA等差异微小的基因表达研究。

本期研发部的同事分享了微滴式数字PCR（ddPCR）原理与应用，现将分享内容也呈现给大家，欢迎各位评论、交流。

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VariantBaits™ Target Enrichment System

液相杂交捕获系统

基于自主知识产权μParaflo® 微流体芯片平台合成RNA捕获探针，采用液相杂交技术捕获靶标DNA，使用生物素标记探针诱饵，探针序列与靶向序列互补，完成靶向序列文库的富集与制备。可用于从小到大规模的基因捕获，容忍某些局部模板的变异。

VariantPro™ One-Step Multiplex PCR System

一步式多重PCR建库系统

经过LC Sciences科学家两年潜心攻关，于2015年成功研发出VariantPro™一步式多重PCR建库系统，在目标区域进行引物设计，通过多重PCR的方式进行目标区域扩增，通常不受引物间模板变异的影响。文库制备可简化成一步，人工操作时间仅5分钟，可用于小到中规模的基因捕获。

了解更多基因捕获技术信息，关注“联川基因”公众号，回复“双V捕获”即可获得。

关于联川生物

杭州联川生物技术股份有限公司（简称联川生物，股票代码：871474）是全球少数几家掌握基因捕获核心技术的国家级高新技术企业，专注为国内精准医学领域提供先进的基因检测解决方案和产品。

联川生物在美国休斯顿设立研发中心，杭州总部建有GMP生产基地，并已获得ISO13485及ISO9001质量管理体系认证，四款成品试剂盒已获得欧盟CE认证。

基于自主知识产权的VariantPro^TM一步式多重PCR建库系统和VariantBaits^TM液相杂交捕获系统，联川生物致力于为企业级客户提供更精确快捷的定制化产品与服务，已为国内上百家知名基因检测公司及医学检验所提供精准医学检测产品。 

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