琼脂糖，低熔点琼脂糖，高分辨率琼脂糖都有什么用途？
关于琼脂糖：
琼脂糖是由1，3连结的β-D-半乳呋喃糖和1，4连结的3，6-脱水α-L-半乳呋喃糖相间联结而成。琼脂糖具有亲水性，并几乎完全不存在带电基团，极少吸附生物大分子也极少引起其变性，是理想的惰性载体。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解，温度下降到35-40℃形成良好的半固体状的凝胶。琼脂糖凝胶是最常用的分离介质，用作电泳和层析载体，分离生物大分子（核酸、蛋白、多糖等）。
琼脂糖凝胶的优点：
1、样品无需预处理，电泳操作简单，电泳速度快。
2、凝胶结构均匀，电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好。
3、凝胶透明无紫外吸收，电泳结果可直接用紫外光灯下监测。
4、易染色，样品易洗脱，便于定量测定。制成干膜可长期保存。
琼脂糖凝胶的制备方法
1、根据电泳需要，配制电泳缓冲液。
2、准确称量的琼脂糖加入三角瓶，加入电泳液（1%琼脂糖凝胶，即为1g琼脂糖，加入100 ml 1×TAE）。总液体量不宜超过三角瓶的50%容积
3、微波炉高火加热至沸腾，保持30秒，戴上防热手套，小心摇动三角瓶，重悬未溶解颗粒，再次高火加热1-2分钟，直至琼脂糖完全溶解。
注：加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4、溶液冷却至60℃左右，可加入EB溶液（终浓度为0.5 ug/ml，其它核酸染料也可），并充分混匀。
5、将琼脂糖溶液倒入制胶模中，在适当位置插上梳子。凝胶厚度一般在3-5 mm之间。
6、室温下自然凝固（约30-60分钟），然后放置于电泳槽中进行电泳。
注： 凝胶不立即使用，用保鲜膜将凝胶包好后在4℃保存，可保存2-5天。
琼脂糖浓度与 DNA 分离范围
| 琼脂糖浓度（%） | 线状 DNA（kb） |
| 0.3 | 25-5 |
| 0.6 | 20-1 |
| 0.7 | 10-0.8 |
| 0.9 | 7-0.5 |
| 1.2 | 6-0.4 |
| 1.5 | 4-0.2 |
| 2.0 | 3-0.1 |
常见问题及解决办法
微波炉溶解琼脂糖时，胶液剧烈沸腾冲溢出三角锥瓶怎么办？
1、总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
2、胶液浓度为2%以上的请设置中火加热。
3、胶液剧烈沸腾时，停止加热，戴上防热手套小心摇动三角瓶，然后再次加热至沸腾，直至琼脂糖完全溶解胶液清澈。
琼脂糖电泳图像背景模糊的原因及解决办法
琼脂糖没有完全溶解会造成电泳图像背景模糊不清。完全溶解的琼脂糖，三角瓶内壁应没有粘附琼脂糖颗粒。
DNA条带模糊，拖尾的原因及解决办法
1、DNA降解。样品应避免放置时间过长，避免核酸酶污染。
2、上样量过多。减少上样量。
3、电泳缓冲液失效。多次使用的电泳缓冲液，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，影响电泳效果。建议更换电泳缓冲液。
4、电泳条件不合适。电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃，超长DNA链，温度应＜15℃。
5、DNA含盐过高。电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
6、蛋白污染。电泳前抽提去除蛋白。
7、DNA变性。电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
DNA条带淡弱或无条带的原因及解决办法
1、上样量不够。增加上样量。
2、DNA降解。避免DNA的核酸酶污染。
3、DNA跑出凝胶。缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度。
4、分子大小相近的DNA条带不易分辨。增加电泳时间，使用正确的凝胶浓度。
5、DNA 变性。电泳前请勿高温加热DNA链，用20mM NaCl Buffer 稀释DNA。
6、DNA链超长，常规凝胶电泳不合适。在脉冲凝胶电泳上分析。
DNA Marker条带扭曲的原因及解决办法
1、配制凝胶的缓冲液和电泳的缓冲液，不是同时配制的。使用同时配制的缓冲液，缓冲液高过凝胶1-2mm。
2、电泳时电压过高。可以在电泳前15分钟用较低电压(3V/cm)，等条带出孔后，再调高电压。
3、尽量慢慢加样，等样品自然沉降后再加电压。
Coolaber琼脂糖（CAT:CA1341）的质检报告
外观 | 白色粉末 |
EEO | ≤ 0.13 |
凝胶温度 | 36℃±1.5℃ (1.5% gel) |
mp | 88℃±1.5℃ (1.5% gel) |
溶解性 | 无色清澈胶液 |
水分 | ≤10% |
凝胶强度 | ≥1200 g/cm2 (1% gel) |
硫化物（SO 42-） | ≤ 0.15% |
灰分 | ≤ 0.5% |
DNA酶& RNA酶 | 未检出 |
蛋白酶 | 未检出 |
核酸内切酶 | 未检出 |
关于低熔点琼脂糖
低熔点琼脂糖即在多糖链上经过羟乙基、甲氧基等基团修饰后的琼脂糖。其能在30℃左右成胶，约65℃熔化，熔化温度低于大多数双链DNA解旋温度。利用低熔点琼脂糖的这种性质可以从凝胶中回收天然形式的DNA。该产品易于溶解，可以配制高至4%凝胶，胶液清澈，有着极高的分辨率。其所制凝胶具有更高的筛过特性，更透明，是理想的小片段DNA（小于1kb）和RNA电泳产品，适宜胶回收；也适合凝胶内酶促反应，组织培养，细胞的克隆和病毒空斑分析。
Coolaber低熔点琼脂糖（CAT:CA1351）的质检报告：
检测项目 | 检测结果 |
外观 | 白色粉末 |
EEO | ≤ 0.10 |
凝胶温度 | 26℃ -30℃ (1.5% gel) |
Mp | ≤65℃ (1.5% gel) |
溶解性 | 无色清澈胶液 |
水分 | ≤ 10% |
凝胶强度 | ≥200g/cm2(1.0% gel) |
硫化物（SO42-） | ≤ 0.10% |
灰分 | ≤ 0.5% |
DNA酶 & RNA酶 | 未检出 |
蛋白酶 | 未检出 |
关于高分辨率琼脂糖：
PCR级高分辨率琼脂糖（High Resolution Agarose）对PCR 产物，小片段DNA具有极高的分辨率，适合1000bp以下DNA电泳，分辨能力约为DNA片段大小的2%。胶液更清澈，可以配制高至5%凝胶。高分辨率琼脂糖凝胶（2%-4%）与聚丙烯酰胺凝胶（4%-8%）的分辨率接近，适宜分离 20 bp - 800 bp DNA片段。适于STR分析，RT-PCR分析。
Coolaber高分辨率琼脂糖（CAT:CA1352）质检报告：
外观 | 白色粉末 |
EEO | ≤ 0.10 |
凝胶温度 | ≤33℃ (1.5% gel) |
mp | ≤70℃ (1.5% gel) |
溶解性 | 无色清澈胶液 |
水分 | ≤10% |
凝胶强度 | ≥750 g/cm2 (1.5% gel) |
硫化物（SO 42-） | ≤ 0.10% |
灰分 | ≤ 0.5% |
DNA酶& RNA酶 | 未检出 |
蛋白酶 | 未检出 |
核酸内切酶 | 未检出 |
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