人类微生物组项目HMP是怎么取粪便样品的?
自从人类微生物组计划(HMP)开展以来,人类健康与肠道微生态研究持续升温,引无数英雄竞折腰,纷纷加入肠道菌群研究大军。
那么,问题来了:粪便样本该怎么取呢?相关的文章很多,但取样方法都写得很简单,很多细节处理起来心里都没底,怎么办!
不用担心,小锐将人类微生物组计划(HMP)和国际人类微生物组标准(IHMS)的取样方法进行了梳理和整合,给大家奉上史上最详细、最权威的的粪便取样方法。
方法
Ⅰ
适用情景:取样4 h内可运输回实验室
1
准备所需器材
2
贴标签,标注信息
将标签纸③贴在带勺粪便采集管②(若粪便采集管自带标签可不用再贴)及自封袋④上。在所有标签上注明取样对象信息(姓名、样本编号、样本类型、取样时间等)。
温馨tips:用透明胶带在粪便采集管标签上至少缠绕一圈,并在管盖上标识名称,更加保险。
3
收集粪便样品
将粪便样本收集系统①置于马桶上,放下马桶座圈,排便,再将手洗干净。
温馨tips:尽量在收集粪便样本前将尿液排尽,再将手洗干净。
省钱tips:可以在盒子上套袋,多次使用。
4
取样
将粪便样本收集系统①的盒子拿出,用勺子②截取粪便中段内部一勺(约1 g,勺子不要装得过分满)。
5
装样
将勺子垂直放入粪便采集管②,拧紧盖子。
6
重复取样
一式三份,重复步骤4~5。
7
寄送样品
将粪便采集管②放入自封袋④中,需在4 h内寄送回实验室进行抽提或-80 ℃保藏。
运输、保存常见问题
解决方法
是否需要液氮速冻?
液氮速冻后,能立即放入冰箱或置于冰盒、干冰上,防止反复冻融的前提下,可以用液氮速冻。
若4 h内无法运送回实验室,该如何操作?
液氮速冻后或直接置于干冰上运输。
其他注意点?
无论采取何种方式取样、运输、保存,同一研究所有样本的采样、运输、保存方式需保存一致。
方法
Ⅱ
适用情景:受试者自己在家取样;或取样后24小时内无法送到实验室且无法干冰寄送
1
准备所需器材
2
贴标签,标注信息
将标签纸⑤贴在带勺粪便采集管②(若粪便采集管自带标签可不用再贴)、运输保护管④及自封袋⑥上。在所有标签上注明取样对象信息(姓名、样本编号、样本类型、取样时间等)。
温馨tips:用透明胶带在粪便采集管标签上至少缠绕一圈,并在管盖上标识名称,更加保险。
3
收集粪便样品
将粪便样本收集系统①置于马桶上,放下马桶座圈,排便,再将手洗干净。
温馨tips:尽量在收集粪便样本前将尿液排尽,再将手洗干净。
省钱tips:可以在盒子上套袋,多次使用。
4
添加保护剂
将粪便采集管②垂直插入运输保护盖④中,打开粪便采集管②,倒入保护剂③。
5
取样
将粪便样本收集系统①的盒子拿出,用勺子②截取粪便中段内部一勺(约1 g,勺子不要装得过分满)。
6
装样
将勺子垂直放入粪便采集管②,保护剂③需没过粪便样本(勺子可剪断,没入保护剂中),拧紧盖子。
7
重复取样
一式二份,重复步骤4~6。
8
竖直静置,使样本和保护剂充分接触
粪便采集管②在室温下,竖直放置至少1 h(使粪便样本在保护剂至少放置1 h)。
9
寄送样本
将粪便采集管②塞入运输保护管④中,放入自封袋⑥,需在7天内寄送回实验室进行DNA抽提。
好嘞,
关于粪便的取样方法和注意事项,
就先讲到这儿喽。
肿么样
是不是收获满满?
那就赶紧撸起袖子,加入肠道菌群研究大军吧!
供稿:巫萍
编辑:王丽燕
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