脐带间充质干细胞移植对糖尿病肾病的临床观察

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病慢性微血管并发症之一，是终末期肾病的首要病因，在我国终末期肾病患者中，15%以上为DN。传统的治疗方法包括严格控制血糖、血压，限制蛋白质摄入，维持水电解质及酸碱平衡等，其疗效多不理想，不能有效阻止患者病情的进行性恶化，直至肾衰竭。

临床上迫切需要找到一种治疗DN安全有效的新方法，因此，福州总医院干细胞治疗科采用经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植脐带间充质干细胞（umbilicalcord mesenchymal stem ce1l，UCMSC）治疗DN患者，观察其临床疗效和安全性。

本次研究选用经胰背动脉、双肾动脉介入移植UCMSC，考虑UCMSC在胰腺内可分化为胰岛细胞，从而提升患者胰岛细胞数量及改善胰岛细胞功能，增加胰岛素分泌量，从而缓解DN患者的临床症状，以及UCMSC在肾脏可分化为多种肾脏细胞，从而改善患者肾功能。

研究通过监测实验组与对照组2组患者治疗前及治疗后3个月的血压、血糖、C肽值以及肾功能指标的变化情况，来分析比较2组患者的治疗效果，评价经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC对治疗DN的临床疗效。

资料与方法

一、病例选择

实验组：干细胞治疗科收治的15例DN患者，男8例，女7例；年龄（46.40±8.91）岁，病程（5.40±1.92）年；对照组：肾内科收治的15例DN患者，男8例，女7例；年龄（46.6±7.89）岁，病程（5.53±1.41）年。两组患者在性别、年龄、病程等方面差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

两组入选患者均为临床期DN患者，其诊断标准为：持续性蛋白尿（24h尿蛋白定量>0.5g，且连续2次），并排除其他可能引起尿蛋白增加的原因；肾功能进行性下降，可伴有糖尿病视网膜病变、水肿、高血压等其他糖尿病的慢性合并症。

两组患者均排除合并恶性肿瘤、全身感染、局部严重感染、结核感染及心、肺、肝等重要脏器的功能障碍者等，对治疗及实验方案知情同意，并且通过医院伦理委员会批推。

二、方法

(一)  UCMSC制备   用于治疗DN的UCMSC均由福州总医院福建省移植生物重点实验室自行制备。产妇知情同意，通过伦理委员会批准，获取足月妊娠的产妇脐带。分离UCMSC：分离并去除脐带外膜和血管组织，取脐带基质，将其剪碎，加入质量分数为0.1%胶原酶IV消化过夜。

离心后，取下层沉淀再用0.25%胰蛋白酶37℃消化1h，过100目筛网，收集含细胞的滤液，离心后计数，接种于低糖DMEM无血清培养基中，置于37℃、5%CO₂培养箱中培养。

移植前所用脐带干细胞均经过检测：细胞呈纺锤状，病原学检查阴性（包括细菌和真菌等），具有典型的间充质干细胞的免疫表型，内毒素试验阴性。

(二)  治疗方法   两组患者均持续治疗1个月，根据病情需要均给予常规治疗：糖尿病饮食，控制蛋白质摄入量，缬沙坦（80mg，口服，每天1次）控制血压，皮下注射甘精胰岛素控制血糖，并且在治疗过程中，根据患者实际血圧、血糖情况及时调整缬沙坦、甘精胰岛素用量。实验组患者在常规治疗的基础上加用经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC进行治疗。

(三)  实验组患者经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC   每周1次，共4次。第1次行导管介入经胰背动脉、双肾动脉移植UCMSC。术前用药：仙特敏、非那根针、安定注射液。经右侧股动脉穿刺，置入穿刺鞘，肝素生理盐水间断推注抗凝，置入动脉造影导管至腹腔干，打入造影剂，保存造影图像。

定位胰背动脉，用5F导管置入胰背动脉，行造影，保存图像，确认该血管正确无误。20min内将UCMSC悬液40m1（细胞数：体质量kg×10⁶个）输注完毕，输注过程中不断检查导管位置，保证导管不从动脉中脱出。之后行双肾动脉介入术，分别定位左右肾动脉，定位退出导管，用5F导管先后置入左、右肾动脉，行造影，保存图像，确认该血管无误，左右各20min内将UCMSC悬液40m1（细胞数：体质量kg×10⁶个）输注完毕，输注过程中不断检查导管位置，保证导管不从动脉中脱出。

术毕拔出穿刺鞘，局部压迫止血15min后，加压包扎，患者平卧，穿刺肢体制动24h。第2~4次UCMSC经外周静脉途径输入移植，每次均输注UCMSC悬液50m1（细胞数：体质量kg×10⁶个），UCMSC移植后均给予心电监护及其他对症支持治疗。

三、疗效评价指标

于治疗前及治疗后3个月监测患者收缩压、舒张压、空腹血糖、餐后2h血糖、空腹C肽，餐后2h C肽以及肾功能指标，如尿素氮、血清肌酐、24h尿白蛋白定量。

四、统计学分析方法

运用R（Version3.2.2）统计软件，收缩压、舒张压、空腹血糖、餐后2h血糖、空腹C肽、餐后2h C肽、尿素氮、血清肌酐、24h尿白蛋白定量计量资料以`x ± s表示，采用配对样本t检验分别对实验组治疗前、后及对照组治疗前、后各项指标的差异进行统计分析比较，采用两独立样本t检验对实验组、对照组治疗前、后各项指标的差值进行统计分析比较，以P<0.05为差异有统计学意义。

结果

一、疗效评估   经治疗后，两组患者的收缩压、舒张压、空腹血糖、餐后2h血糖、尿素氮、血清肌酐、24h尿白蛋白定量均较治疗前下降，空腹C肽、餐后2h C肽值均较治疗前升高，差异均有统计学意义（P<0.05，表1、2）。

对两组患者治疗前及指疗后3个月的各项指标差值进行比较，在舒张压、尿素氮、血清肌酐、24h尿白蛋白定量这4个指标方面，实验组患者下降程度较对照组明显，差异有统计学意义（P<0.05，表3、4）；在收缩压、空腹血糖、餐后2h血糖、空腹C肽、餐后2h C肽这5个指标方面，差异无统计学意义（P>0.05，表3）。

二、安全性分析   经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC后，患者出现穿刺点渗血1例、乏力症状2例、低热（体温36.9℃）1例，给予对症处理后可完全缓解。

相关阅读：干细胞治疗糖尿病肾病效果显著，临床试验已获国家备案

讨论

DN是糖尿病常见的微血管并发症，是糖尿病终末期主要死亡原因之一。其发病机制包括：(1)氧化应激损伤；(2)晚期糖基化终产物的堆积；(3)慢性炎症反应，(4)肾素-血管紧张素系统的改变。

DN组织学改变包括肾小球硬化、肾小管间质纤维化、小动脉玻璃样变等。目前DN常规治疗的效果欠佳，只起到延缓病情发展的作用。

UCMSC是存在于新生儿脐带组织中的多功能干细胞，在特定的条件下可诱导分化为破骨样细胞、心肌细胞和神经元样细胞等。UCMSC生物学特性有以下几点：(1)多能性或全能性：(2)自我更新能力：(3)高度增殖能力；(4)免疫二元性，可以抑制不同物种间的免疫排斥反应，同时对同种异体屏障具有免疫耐受性。因其具有良好的多向分化潜能和活跃的增殖特性，因此，UCMSC移植为DN的治疗提供了一种新方法。

但经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC治疗DN，在控制好舒张压、尿素氮、血清肌酐和24h尿白蛋白定量方面，其疗效优于单纯控制血压、血糖等常规治疗方法，尤其在改善患者肾管功能方面效果显著；其作用机制可能为UCMSC移植后。

在体内分化为胰岛细胞或促进胰腺内源性胰岛细胞再生，同时UCMSC可以分化为多种肾脏细胞，包括系膜细胞、内皮细胞、上皮细胞，促进肾脏结构和功能恢复，UCMSC也可通过旁分泌/内分泌营养性生长因子，调节免疫反应，最终促进肾脏修复，从而显著改善患者肾功能。

治疗后两组的空腹和餐后2h血糖比较，实验组虽低于对照组，但无统计学意义；治疗后两组的空腹和餐后2hC肽值比较，实验组虽高于对照组，但无统计学意义，可能与胰岛细胞的诱导分化和成熟比较缓慢而观察时间尚短有关。

本次研究的不足：（1）样本量小且观察时间短，为了得到更安全可靠的临床疗效，还需进行大样本和长期的术后随访；（2）未采取盲法，实验组患者对移植UCMSC知情同意，易产生偏移。

笔者认为，与传统的治疗方法相比，UCMSC移植治疗DN是一种新型且有效的治疗方法，能显著改善患者肾功能和延缓糖尿病慢性并发症的进展，从而提高患者的生活质量，具有广阔的应用前景。

精准医疗引领健康未来想知道更多，扫码关注公众号

你若喜欢，别忘了点个在看哦