单细胞悬液的注意事项之细胞结团率高 | 单细胞知识微问答

利用10X Genomics和BD等单细胞平台进行后续细胞标记之前，如何对组织进行解离消化和制备成功的单细胞悬液需要有非常多的细节注意。

今天，就给大家带来制备单细胞悬液的注意事项之-：细胞结团率高

建议在1×PBS+0.04％BSA中洗涤和重悬细胞，为了避免细胞出现聚团，可以提高BSA含量，培养基中较高的BSA浓度（0.1-2％BSA）不会对后续流程和数据产生影响；

通过轻微吹打的方式打散细胞团；

有一些细胞类型，例如PBMC在PBS中保持时间较长时，容易形成团块。通过移液器吹打的方式不容易打散，因此可以降低悬浮液中细胞的有效浓度，另外细胞悬浮液在制备后尽量在30分钟内上机捕获标记。

样本初制备时细胞浓度低于5000 cell/μL，建议上机前细胞浓度700-1200 cell/μL

部分细胞濒临死亡的时候，会释放出DNA，这会使得细胞周围较为粘稠，形成结团。加入适当的DNase I可以缓解结团率高的现象。

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