基于积极的早期临床数据，非病毒载体转染的CAR细胞疗法扩展临床研究丨医麦猛爆料

本文由医麦客原创，欢迎分享，转载须授权

2020年8月20日/医麦客新闻 eMedClub News/--近日，全球性生命科学公司MaxCyte宣布，其子公司CARMA Cell Therapies即将扩展其主要候选产品MCY-M11的试验，扩展将涉及新的患者队列以及启动两个新的临床站点。

MCY-M11是一款基于mRNA非病毒技术开发的、靶向间皮素（Mesothelin，meso）的CAR-PBMC细胞疗法，目前正在进行 1 期临床试验（NCT03608618），通过腹腔内注射（ip）治疗复发性/难治性卵巢癌和腹膜间皮瘤患者。

此次试验扩展的内容为：新的患者队列将在更多复发性/难治性卵巢癌和腹膜间皮瘤患者中进行 MCY-M11 腹腔内给药的剂量递增评估，并在 MCY-M11 给药前进行环磷酰胺预处理。该新队列将独立于目前没有预处理的队列进行，在未来该试验还将允许针对预处理和非预处理患者进行多治疗周期。

新的临床站点为：这项研究的新临床地点在马萨诸塞州总医院/哈佛医学院、哈肯萨克大学医学中心，与现有的站点美国国立卫生研究院国家癌症研究所和圣路易斯华盛顿大学一起进行临床试验。

临床数据验证

今年5月，该公司在ASCO 2020上公布了 MCY-M11 临床研究的初步结果，该结果显示积极。

MCY-M11是一款基于新鲜的、未扩增的、自体外周血单个核细胞（PBMC），并利用编码人抗间皮素的CAR mRNA对PBMC进行电穿孔转染的CAR细胞疗法，可以实现快速生产（＜1天）。

该 1 期临床试验采用3+3设计，患者接受不同剂量水平（DL）的MCY-M11的输注，1周3剂，ip给药，不进行预处理。剂量水平分别为：DL1 1.0 x 10⁷细胞/剂量、DL2 5.0 x 10⁷细胞/剂量、DL3 1.0 x 10⁸细胞/剂量、DL4 5.0 x 10⁸细胞/剂量。

▲ 图片来源：meetinglibrary.asco

数据截止2020年1月，DL1和DL2队列已经完成研究，试验没有引起安全隐患。11名患者接受DL1，DL2和DL3治疗，结果显示MCY-M11腹腔注射给药安全且耐受性良好。

没有发生与输注相关的不良事件，也没有发生剂量限制毒性，尚未观察到神经毒性。与治疗相关的不良事件（AE）大多数为NCI CTCAE 1-2级，DL3队列中的一例患者出现G2心包炎、发烧和短暂性中性粒细胞减少，经临床评估为相关SAE，随后得到缓解没有进一步的并发症。试验报告了两种不相关的SEA：一名DL2队列患者经历G2混乱（confusion），一名DL3队列患者经历G3肠瘘。没有与治疗有关的停药和死亡。

经RECIST 1.1评估，3例DL2队列患者显示疾病稳定（SD），除了一名患者没有参与后续随访，一例患者保持疾病稳定6个月，一例患者保持疾病稳定2个月；DL3队列中，一例患者在2个月时保持疾病稳定，其余2例尚待评估。该公司预计将在2020年下半年获得更多的临床数据。

▲ Claudio Dansky Ullmann博士（图片来源：公司官网）

该数据证实了一天制造MCY-M11并通过ip给药的可行性和安全性，并验证了MaxCyte公司专有的CARMA™自体细胞治疗平台。结果支持这项研究扩展和新策略的寻求，例如增加预处理方案、提供多个疗程以进一步提高疗效。

CARMA Cell Therapies的首席医疗官Claudio Dansky Ullmann博士表示：“迄今为止，我们对这项试验的进展感到非常满意，我们正朝着为实体瘤患者提供更有效的免疫治疗选择的方向迈进。”

CARMA技术平台

先前，Maxcyte作为全球电转染领域的领导者已经被业内人士所熟知。但与此同时，公司也在致力于开发自己的疗法。其中MCY-M11作为下一代CAR工程细胞疗法的候选药物，是通过公司特有的CARMA技术平台开发的。

▲ 基于CARMA技术平台开发的CAR疗法(图片来源 MaxCyte)

利用mRNA来设计外周血单核细胞(PBMCs,巨噬细胞的前身)，使其表达针对癌细胞的CAR。区别于传统的CAR疗法，这种CAR疗法提供瞬时表达，无需病毒载体或细胞扩增，能够快速制造并及时回输到患者体内。

▲ CARMA技术平台优势(图片来源 MaxCyte)

另外，需要注意的是，这项在研的CAR疗法基于巨噬细胞。也就是说，其能够直接吞噬杀死癌细胞并引发T细胞应答，起到双重抗癌的作用。相比较传统CAR-T，能够更有效的渗透到肿瘤深处。

非病毒CAR细胞疗法

事实上，更多的公司利用病毒制备CAR细胞疗法，但是由于病毒载体制造过程复杂、成本昂贵、且监管严格，因此越来越多的公司将目光投向具有更多优势的非病毒载体。

传统的制造CAR-T细胞的方法包括使用病毒载体和在集中的制造设施中进行数周体外细胞扩增从而达到临床要求的相关细胞数量，这导致CAR-T细胞表型衰竭、制造成本高和治疗延迟。

相对于病毒载体系统而言，非病毒载体生产制备的CAR-T细胞治疗产品的生产工艺更加简单从而直接导致成本降低，且更容易进行质量控制；同时在存储上面来说，非病毒载体所使用的质粒DNA或mRNA稳定性更高，存储的要求也比病毒载体系统的RNA病毒更低，有效期更长。

目前，国内外存在的几种制备CAR-T细胞的非病毒载体如下，以Poseida/上海细胞治疗集团为代表的piggyBac非病毒载体（PB转座子）、以Ziopharm/ Precigen为代表的Sleeping Beauty非病毒载体（SB转座子）和以宾夕法尼亚大学Carl June团队为代表的mRNA载体。

• piggyBac转座系统

piggyBac转座子最初于1983年在飞蛾中发现，2005年被成功用于哺乳动物细胞的基因操作。像其他转座子一样，piggyBac有两个组件：一个转座子和一个转座酶。

非病毒piggyBac平台不使用病毒载体。对于这种技术最重要的是，转座酶能够以完全无缝的方式切除转座子，不留下任何序列或突变。可有效地将大量CAR分子基因传递给T细胞，拥有产生的Tscm百分比高、装载量大（超过200 kb已被证明）、降低风险、稳定高效、生产成本低时间短等优点。

▲ PB转座子（图片来源:cyagen.com）

其中Poseida的PB转座子开发的候选CAR-T细胞疗法P-PSMA-101，在一项临床试验中发生一例患者死亡事件，该实验也遭到了FDA的临床搁置。由此可见，CAR细胞疗法的安全性至关重要。

• Sleeping Beauty非病毒载体

Sleeping Beauty转座系统是Tc1/mariner 转座子超家族中的一员，已沉寂了一千多万年，直到1997年，Ivics等才揭示了其转座活性。

转座时转座序列和转座酶，类似于“剪切粘贴”的方式，转座子载体系统转座时可携带一段外源DNA 序列，利用这一特性可以用于转基因、基因筛选及基因治疗等领域具有很好的应用前景。它能在体外培养的大多数脊椎动物的细胞中发生转座，介导外源基因的稳定整合和长期表达。

▲ Sleeping Beauty转座子系统

目前，SB系统已发展为非病毒载体，是除了慢病毒、逆转录病毒制备CAR-T之外的另一种非病毒的基因转染新方法。作为更快更便宜的替代方案，SB系统将来很可能替代目前繁琐的基因敲除和RNA干扰技术, 在功能基因组学研究及基因治疗等领域发挥重要的作用。

关于更多的非病毒载体CAR-T内容，8月21日（周五）20：00-21：00，医麦课堂邀请了西安桑尼塞尔生物医药CEO、首席科学家彭作翰博士，为您带来“下一代CAR-T升级之路——非病毒载体与基因敲入技术略谈”为主题的课程。

将从CAR-T行业痛点出发，总结目前非病毒载体和基因敲入技术在CAR-T细胞治疗中的应用，并且重点介绍该领域的国际最新进展，以此与行业众多同行交流碰撞，一起推动细胞治疗领域的新技术革命。

授课专家简介：彭作翰，北京大学医学部病理系博士，博士期间主要从事肿瘤的发病机理研究。后任职于恒瑞医药，负责肿瘤免疫项目开发。2017年7月于西安创立了桑尼赛尔生物医药，任CEO兼首席科学家。同时受聘于西北大学生命科学与医学部，任研究员、肿瘤免疫治疗中心主任。

医麦课堂

为助力中国生物医药产业人才成长，医麦客特隆重推出“医麦课堂”栏目，诚邀生物医药行业内资深权威的大咖专家，聚焦新药研发过程中的各类问题，为广大医药产业人才提供即时即看即学的精彩课程。目前已推出十余期，在线浏览人次2W+，深受好评！

参考资料：

1.https://www.maxcyte.com/carma-cell-therapies/

2.https://www.prnewswire.com/news-releases/carma-cell-therapies-expands-phase-i-trial-of-anti-mesothelin-mrna-car-pbmc-cell-therapy-mcy-m11-301113723.html

3.彭作翰：非病毒载体与基因敲入技术，CAR-T下一代升级之路？

医麦客近期热门报道

点击“阅读原文”，免费看直播！