都说肝癌难治，“一次性治愈”的细胞疗法在我国发展如何？
2022年5月10日/医麦客--星耀研究院新闻 PharmaBIGStar News/--肝癌是我国第4大常见恶性肿瘤，同时也是第2大恶性肿瘤致死病因。常规的治疗虽然也发展出外科、介入、药物、放射等多种方法共同应对的局面，取得了显著进步，但也已出现“天花板效应”--目前我国肝癌患者5年总体生存率不足5%，人们常常感叹“肝癌难治”。近年来，随着CAR-T疗法在血液瘤方面“一次性治愈”式的治疗效果，让人们萌发了肝癌治愈的希望，中国生物制药领域的科研人员多年的深耕也使肝癌由“难治”向“可治”、“易治”的目标迈进。
国内肝癌CAR-T细胞疗法进展
CAR-T细胞疗法的一个核心点就是靶点的选择。近年来的肝癌靶点选择主要集中在GPC(glypican,磷脂酰肌醇蛋白聚糖)3上。GPC3是一种细胞膜表面的硫酸乙酰肝素(HS)糖蛋白，其HS基与生长因子及其受体、细胞外基质蛋白和黏附分子等相互作用, 参与调节细胞增殖、分化、黏附和迁移等。GPC3是肝癌特异性相关抗原，在肝癌 (76%)、肺鳞状细胞癌(52%)、生殖细胞癌 (44-100%)等实体肿瘤中高特异性过表达，尤其在HCC(肝细胞肝癌)中表达阳性率近90%。因此，目前国内企业如科济药业、药名巨诺、传奇生物、优卡迪、华夏英泰、艺妙神州、吉凯基因、原启生物、昭泰医疗等纷纷于此深耕。
此外，AFP(甲胎蛋白)AFP 作为肝癌诊断中最早发现也是应用广泛的血清学标志物，在肝癌的临床诊断和预后中有着重要的研究价值。研究发现 AFP具有信息调控分子样作用，AFP不仅能阻断凋亡信号的传递，而且能具有抗凋亡诱导的功能，靶向抑制AFP表达能增加肝癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和全反式维甲酸(ATRA)的敏感性。因此，也成为治疗肝癌的CAR-T细胞产品的重要靶点。
科济药业
科济药业具有增强实体瘤的下一代技术平台CycloCAR和精准靶向的技术平台LADAR。CycloCAR技术平台中，CycloCAR-T细胞通过设计表达细胞因子L-7(白介素-7)和趋化因子CCL21,有望显著增强针对实体瘤CAR-T细胞的疗效。在体内研究中，在三种实体瘤模型并且是无需环磷酰胺预处理的条件下，Cyclo CAR-T细胞显示出优于传统CAR-T细胞或7x19CAR-T细胞(共表达L-7和CCL19)的优越治疗效果。LADAR技术平台中，目标基因的细胞内转录由一个人工受体控制，该受体在细胞内结构域中含有转录因子，一旦LADAR受体的胞外结构域与触发抗原(发送者抗原)结合，转录因子就会被切割并转移到细胞核，从而触发目标基因的表达。此项技术以LADAR-CAR电路形式，帮助CAR-T细胞杀死目标细胞，降低在靶脱瘤毒性。在体外研究中，LADAR®系统在没有触发抗原的情况下几乎没有泄漏表达。因此，LADAR技术是开发CAR-T细胞的强大工具。
基于公司CycloCAR和LADAR技术平台，公司开发出3种针对GPC3靶点治疗肝细胞癌的CART-T候选产品，即CT011、CT0180、CT1081，目前皆处于临床I期。
➤ CT011：是一种潜在全球同类首创的CAR-T细胞候选产品(人源化GPC3 CAR-T)，具有治疗肝细胞癌(HCC)的概念验证临床数据。2019年获得国家CDE的默示许可。科济药业联合上海交通大学医学院附属仁济医院共同完成了CT011治疗晚期肝细胞癌的临床I期研究。这是全球首个靶向GPC3 CAR-T疗法治疗肝细胞癌的临床试验。结果显示，13例GPC3阳性晚期肝癌患者，半年、1年、3年的生存率分别为：50.3%、42.0%和10.5%。有2例患者的生存时间分别达20.5个月和44.2个月。安全性方面，没有患者发生3/4级神经毒性反应。公司已在中国完成I期试验患者入组。
➤ CT0180：被设计为一种表达靶向GPC3抗体融合T细胞受体(aTCR)的融合蛋白的自体T细胞产品。临床前研究显示，在小鼠异种移植模型中，CT0180可有效识别和杀死GPC3阳性肝细胞癌细胞并大幅抑制HCC肿瘤生长，体内及体外的细胞因子释放低于GPC3 CAR-T细胞，提升了过继性细胞疗法的安全性及适用性。
➤ CT0181：一种采用靶向GPC3抗体融合T细胞受体共表达IL-7细胞因子的自体T细胞产品。临床前研究表明，与GPC3 CAR-T细胞相比，CT0181在具有低细胞因子释放的实体瘤异种移植物中显示出卓越的抗肿瘤功效、T细胞持久性及免疫记忆。
▲ 科济药业研发管线
药明巨诺
药明巨诺是由我国CXO行业龙头药明康德和全球肿瘤细胞免疫疗法的领军企业Juno Therapeutics于2016年共同创办，在客户资源、赋能平台、人才优势等多方面享有优势，已建立了成熟稳定的工艺体系与国际领先的cGMP(动态药品生产管理规范)生产质量管理体系, 是中国CAR-T临床研究领跑者之一。2020年7月，药明巨诺宣布完成了对Eureka Therapeutics(优瑞科)旗下Syracuse Biopharma（香港）有限公司的收购，从而获得了针对AFP(甲胎蛋白抗原靶点 ) 用于治疗常见类型的肝癌肝细胞癌(HCC)的ARTEMIS®平台技术，并获得优瑞科专有的针对实体肿瘤的ARTEMIS antibody TCR技术在中国及东南亚国家的授权许可，两项技术皆有助于实体瘤T细胞免疫疗法的研发。
基于公司的多种优势和优瑞科的TCR-T、ARTEMIS®技术平台，公司开发出JWATM203、JWATM213、JWATM204、JWATM214，共4款治疗肝细胞癌的细胞治疗产品。其中WATM203、JWATM213针对的靶点是AFP，而JWATM204、JWATM214针对的靶点是GPC3，目前此4款产品在中国皆尚未进入临床，但JWATM203及JWATM204目前由优瑞科在美国根据临床研究用新药(IND)上市申请进行I/II期试验。
➤ JWATM203：是一种针对AFP的TCRm T细胞疗法产品，目前尚未进入临床，但其合作伙伴优瑞科用于治疗肝癌的ET140202 Artemis T细胞疗法已在美完成phase 1/2期临床试验。
➤ JWATM213：一种以AFP为靶点治疗HCC的TCRm T细胞疗法，通过与Lyell合作获得的技术(T细胞抗衰竭功能)来增强T细胞功能并提高疗效。
➤ JWATM204：为靶向GPC3的T细胞疗法，其有望成为治疗GPC3阳性HCC(肝细胞癌)患者的较好治疗手段。
➤ JWATM214：是药明巨诺利用Lyell(细胞免疫疗法公司)技术开发的另一种以GPC3为靶点的T细胞疗法候选产品。
▲ 药明巨诺研发管线
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传奇生物
2021年10月18日，传奇生物披露了GPC3)作为其 LB2101 肝细胞癌(HCC) 和非小细胞肺癌(NSCLC)项目的靶点。LB2101 LB2101包含人源化scFv，对人GPC3具有高亲和力(73±8.7pM (SPR))，LB2101包含人源化scFv，对人GPC3具有高亲和力(73±8.7pM (SPR))。同时，经过“武装”，LB2101可表达被肿瘤微环境(TME)中信号激活的跨膜蛋白，因此它只有在TME信号和GPC3信号同时存在时才能被激活，从而增强其在TME中的持久性和活性，同时克服TME的免疫抑制信号。传奇生物正在计划针对HCC进行首个人体研究，未来可能将适应症扩展到其他癌症。在发现阶段，LB2101 CAR 表现出与目标蛋白 GPC3 的强特异性结合，并无脱靶结合。体外和体内研究显示，LB2101 以靶标依赖的方式具有强大的肿瘤杀伤作用，而无脱靶细胞毒性。传奇生物正在计划针对HCC进行首个人体研究，未来可能将适应症扩展到其他癌症。
▲ LB2101作用机制
优卡迪
优卡迪拥有SMART技术平台和MADDS技术平台。SMART 核心技术能快速找到drugable基因沉默赋能元件，有效的降低靶蛋白的表达。MADDS 核心技术能通过整体方案设计和优化系统，快速筛选和优化CAR-T的靶向分子(scFv)和预测CAR-T的成药性，极大的降低了开发时间成本和研发成本。基于公司的这两个技术平台，开发出治疗肝癌的通用型CAR-T产品U90，目前处于临床前研究阶段。
▲ 优卡迪研发管线
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华夏英泰
华夏英泰拥有两大独有技术平台STAR-T和enTCR-T。STAR-T平台采用具有自主知识产权的创新型抗原受体复合物结构，整合了CAR-T和TCR-T两者的优势，既保留了CAR-T针对细胞表面抗原不受HLA配型依赖限制的优势，又兼具了TCR-T进化而来的内源天然信号传递的下端恒定结构。因此具有高效且低副作用的优势；同时，由于其无本底非抗原刺激激活，从而其耗竭也比CAR-T慢，可增加对实体瘤组织的浸润性，因此在实体瘤治疗领域极具优势，是一种全新的潜力巨大的细胞疗法。enTCR-T以病毒靶点为突破口，后期聚焦新抗原靶点的实体肿瘤治疗，已建立完备的抗原表位预测平台、多HLA型的四聚体制备平台、高通量的T细胞受体克隆筛选鉴定平台等，开发的enTCR-T品种已在临床上显示出安全的、良好的治疗效果。
基于STAR-T和enTCR-T两大技术平台，华夏英泰开发出针对GPC3加趋化因子受体治疗肝癌的STAR-T产品YTS102，目前处于临床前研究阶段。
▲ 华夏英泰研发管线
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艺妙神州
艺妙神州拥有T细胞研发及产业化技术平台和基因细胞药物分析技术平台。T细胞研发及产业化技术平台包括GMP级T细胞产业化技术平台、国内首创无血清制备工艺、InnovaCAR-T(CAR分子设计和筛选平台)、DuraCAR-T(长效T细胞工艺)、HPCAR-T(快速CAR-T制备工艺)、UCAR-T(通用型CAR-T研发平台)等六项子平台或技术工艺。基因细胞药物分析技术平台具有完善的质粒/病毒/细胞分析方法和GMP质量控制体系。
基于两大技术平台，艺妙神州开发出针对GPC3治疗肝癌的的CAR-T产品IM83。IM83 CAR-T已被证实能有效杀伤靶点表达阳性的肝癌细胞，在肝癌小鼠模型中具有显著且持久的抑瘤效果，并在针对晚期肝细胞癌的探索性临床研究中显示出良好的安全性，目前处于探索性临床阶段。2022年1月25日，艺妙神州与誉衡生物就晚期肝细胞癌免疫联合疗法的临床研究及产业化达成战略合作，双方将通过共同探索IM83 CAR-T与PD-1单抗产品赛帕利单抗注射液(zimberelimab，誉妥®)联合用药模式，开拓和革新治疗思路和策略，共同推动晚期肝细胞癌免疫治疗的临床研究以及产业化。
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吉凯基因
吉凯基因拥有三大技术平台，即GRP平台、CHAMP平台、细胞治疗平台。GRP平台一直围绕RNAi等技术，开展药物靶标发现及其衍生业务。作为GRP平台的核心要素，吉凯基因早在2009年就开始构建自有的GRNAi文库，并且持续十余年以高度标准化的研究数据对其进行标注，目前文库对NCBI数据库中人类蛋白编码基因的覆盖率超过90%，具有高覆盖、高均一性、高稳定性的优势，以此奠定了公司靶标发现的基石。CHAMP平台用于开发临床研究中安全有效的候选药物，可以达到高灵敏度、高通量、免钩状效应干扰、免洗的抗体筛选过程，可实现24小时超5万候选抗体在细胞表面的结合筛选，相比于行业内常用的流式细胞检测方法，可达到其5倍的抗体结合检测通量，从而缩短抗体筛选时间，提高了筛选效率。细胞治疗平台基于与研究型医生的充分合作，吉凯基因开发了一整套成熟的细胞治疗药物研发平台，包括CAR-T技术和TCR-T技术等平台。
基于三大技术平台，吉凯基因开发出靶向GPC3治疗肝癌的CAR-T产品GB-5011，目前正在开展探索性临床I/II期研究(NCT02715362、NCT03130712)，截至目前吉凯基因尚未向CDE提交临床申请。
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原启生物
2021年6月4日，原启生物联合浙江大学附属丽水市中心医院和上海长征医院在2021年美国临床肿瘤学会(ASCO)年会上首次公布其评估靶向GPC3的CAR-T药物(Ori®CAR-001)治疗复发/难治性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的最新临床研究数据(Abstract ID: 4095)。该研究的初步数据显示，Ori®CAR-001在GPC3阳性复发/难治性患者中表现出良好安全性和有效性。该临床项目的PI之一的国家重点研发计划首席科学家、浙江省影像诊断与介入微创研究重点实验室主任纪建松教授表示，“复发/难治肝细胞癌目前没有有效治疗手段，细胞治疗实体瘤由于受到肿瘤微环境等因素影响难以突破。而原启生物的Ori®CAR-001细胞治疗复发/难治性肝细胞癌客观缓解率达到了44%，疾病控制率达到了77%，是目前已上市药物无法企及的兼具安全可控和良好抗肿瘤活性的效果。基于前期良好的疗效和安全性数据，Ori®CAR-001细胞药物有望成为晚期肝细胞癌患者新的治疗选择。”此外，公司的Ori®CAR-007亦为治疗肝细胞癌的CAR-T产品，目前处于IND Enabling阶段。
▲ 原启生物CAR-T产品研发管线
昭泰医疗
昭泰(中国)免疫细胞集团在2018年正式实施复发难治型实体瘤临床研究，并同样取得了良好的治疗效果。同年，一名三十多岁复发难治晚晚期肝癌转移男性患者，于五月、六月注射昭泰CAR-T之后，肝内转移灶显著缩小，从原先的25MM缩小为5MM，且失去了活性，此外，胰腺癌患者段某、直肠癌患者王某在接受CAR-T治疗之后，病情都得到了有效控制。目前，公司研发的Anti-GPC3-T cells处于临床I期。