SOP文件 | 白细胞WBC手工法计数操作规程及临床意义

检测原理:

用稀醋酸溶液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，滴入计数盘中，在显微镜下计数一定范围中的白细胞数，并经换算即可求得每升血压计液中各种白细胞的总数。

目的：根据白细胞的高低变化，协助各种相关疾病的诊断。

检测试剂:

1%Hcl：浓盐酸1ml加10g/L美蓝(或结晶紫)数滴加蒸馏水至100ml.醋酸可溶解红细胞；美蓝（或结晶紫）可使白细胞核略为着色,并易与红细胞稀释液区别。

检测仪器：显微镜；血细胞计数盘；微量吸管。

标本采集及处理: EDTA抗凝血或手指血。

1、采血步骤

（1）登记：登记的内容包括病人的姓名，病历号，采血时间，登记编号，医生姓名，送检部门等。

（2）识别病人：问清病人并识别病人是至关重要的。

（3）病人的体位：坐位采血；卧位采血；采血时病人的口中不准含食物、口香糖等，以防意外。

（4）选择适当的静脉，最宜采血的肘窝静脉，也可在腕，手，踝静脉采血。

2、注意事项:

（1）病人宜处于休息状态，并且在早餐前采血（乳糜血影响检测结果）。

（2）针头不应小于21GAVGE。国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头，确保针头与空针联接牢固，以免产生泡沬。

（3）抽血时要“一针见血”，如抽血过慢或不太顺利，将会影响检测结果。

（4）取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，混合抗凝标本时需轻微的但彻底的混匀，一般轻轻的翻转5至10次，要避免用力振摇，以免标本溶血影响结果。

3、抗凝剂的选择：EDTA抗凝

4、 标本的送检

（1）标本采取前先将标本编号贴在采血管上，采血后应进行核对。

（2）标本应带盖存放；存贮时间为2－8℃＜4小时；因此取血后应及时送至实验室，以免检测结果受到影响。

5、标本处理

(1) 检验人员收到标本后应首先逐个检查其是否符合检验要求。如果不符合检验要求的标本需通知临床重新采血。

(2) 包括抽血量不标准（过多或过少）、目测发现采血管中存在小血丝或小血块，如果排除病人体内自身溶血的情况，人为造成的溶血标本以及重度乳糜血的标本等。

(3)核对化验单申请检验项目，编号登记。

操作步骤：

1、取清洁小试管1支，加入稀释液0.38ml

2、75%酒精将皮肤消毒后待干，穿刺皮肤，第一滴血弃去并准确采血20ul，吹入上述试剂并吸上清液洗试管数次，混匀

3、混匀后,以吸管吸取混悬液充入计数池中，静止2-3分钟

4、用低倍镜计数四个大格所有白细胞数

5、计数完毕,计数盘和盖玻片及时用水冲洗然后用细绒布拭净

计算：白细胞/L={(四大格内白细胞总数)/4}×10×20×10⁶

式中:  ÷4: 即得每大格白细胞平均数

×10: 由每大格细胞数换算为每微升细胞数

×10⁶: 由1微升换算成1升，因为1L=10⁶μl

×20: 血液稀释倍数

参 考 值：成人：(4～10) x 10⁹/L

  新生儿: (15～20) x10⁹/L

  6月～2岁: (11～12) x 10⁹/L

临床意义：

1、生理变化 

（1）年龄因素：新生儿的白细胞数较高，一般在（15～20）×10^９／L，以后下降至成人水平。

（2）日间变化：一般人在安静时白细胞较低，活动和进餐后较高；午后高于清晨，一日之内白细胞的最高值与最低值之间可相差一倍。

（3）运动、疼痛和情绪的影响：一般脑力劳动和体力劳动、冷热水浴、日光和紫外线照射均可使白细胞升高。

（4）妊娠孕妇中晚期白细胞可达（12-17）×10^９／L，分娩时最高可达34×10^９／L。

2、白细胞总数病理性增多

（1）急性感染：金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等化脓感染，如败血症、急性风湿、扁桃体炎、阑尾炎等。

（2）急性中毒：急性化学药物如安眠药、敌敌畏等中毒，以及代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒及慢性肾炎尿毒症，常见白细胞增多。

（3）急性大出血：特别是体内出血如脾破裂或宫外孕输卵管破裂后，白细胞迅速增高。

（4）白血病及恶性肿瘤：急慢性粒细胞白血病时常见白细胞增多，恶性肿瘤晚期，特别是消化道恶性肿瘤，白细胞数增高。

3、白细胞总数病理性减少

（1）某些感染：有些革兰氏阴性杆菌感染，如伤寒、副伤寒杆菌感染时，如无并发症，白细胞均减少。某些病毒、某些疟原虫亦可使白细胞减少。某些自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮等。

（2）再生障碍性贫血：红、白细胞及血小板均明显减少，呈“三少”现象。

（3）机体长期接触放射线及接受放疗、化疗的患者，因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致使白细胞减少。

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