原理:
TRIS缓冲液(PH8.25)……………………………100mM双苷肽……………………………………………… 100mM叠氮钠……………………………………………… 0.2g/LL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺……………………25mM6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分,否则会得到假阳性结果。7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。8、标本只能复溶一次,检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来,并重新离心,原始管中含有分离介质(分离胶)的可以不再离心。11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时,将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。操作步骤:工作液和比色杯保温到37℃;实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃
| 微量 |
工作液 | R1 | 120μl |
R2 | 30μl |
标本 | 6.0μl |
混匀,准确记录时间,放设定温度1分钟后在波长405nm处以蒸馏水校零,连续监测3分钟,计算△A/min。
计算:γ-GT(U/L) = △A/min × F(微量1421)2、本试剂在△0.3A/min内,线性良好。若每分钟吸光度变化值(A/min)大于0.3,则以0.1ml样本加0.5ml生理盐水稀释,再测定,结果乘以6。3、如试剂空白吸光度大于0.7或试剂混浊,请勿使用。γ-谷氨酰转肽酶是一种肽移换酶,它催化谷胱甘肽或其它含谷氨酰基多肽上的谷氨酰基团转移到其它合适受体上。血清中γ-GT主要来自肝脏,因此各种肝胆系统疾病可引起血清中γ-GT活力的增高。γ-GT测定主要用于胆汁淤滞及肝占位性病变的诊断。肝内外阻塞性黄疸患者血清γ-GT均显著升高,其幅度与阻塞程度呈正相关,阻塞越重升高越显著。急性肝炎,慢性活动性肝炎和进行性肝硬化γ-GT可升高,但不及阻塞性黄疸明显。急性肝炎恢复期,若γ-GT仍高于正常,提示肝炎仍未痊愈。慢性肝炎,肝硬化若其值持续升高,示病情不稳定或有恶化趋势;逐渐下降,提示肝内病变向非活动性移动。γ-GT也升高,显著性升高是酒精性肝病的重要特征。肝癌患者γ-GT活性显著升高,尤其是恶性肿瘤肝转移及肝癌手术复发时更明显,阳性率可达90%。γ-GT升高幅度与癌组织大小及范围有关,当肿瘤切除后,γ-GT可降至正常,复发时又升高,故动态观察可监测疗效,判断预后。
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