SOP文件 | 胆碱酯酶(CHE)速率法操作规程及临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪     

原理：

组成成分：

溶液A：

缓冲液（PH7.6）……… …………0.02mol/L

DTNB………………………………0.25mol/L

溶液B：

丁酰硫代胆碱………………………6mmol/L

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、溶血标本不能检测。

工作液的配制：

双液体试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：480nm     比色杯光径：1cm

测量：相对于空气  反应温度：  37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	250μl
R2	50μl
标本	3.0μl

混匀，准确记录时间，放设定温度1分钟后在波长480nm处以蒸馏水校零，连续监测3分钟，计算△A/min。

计算：CHE（U/L） = △A/min × F

线性范围：0～18000U/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血

参考范围：

4000～11000mmol/L

注意事项：

1、试剂用量可根据需要按比例调节。或根据计算公式，调节F值。请根据仪器使用情况选择适当的波长、样本和试剂设置。

2、建议各实验室建立自己的正常值范围。

3、结果如超过线性范围，请用生理盐水将标本按1∶1稀释，测定结果乘2。

4、如仪器内无所提供波长的滤光片，选择波长接近的滤光片数值输入。

贮存条件与有效期：

原包装试剂2℃～8℃储存至标签所示失效日期；试剂R1与R2开封后，2℃～8℃稳定14天。

临床意义：

胆碱酯酶（CHE）可用于有机磷杀虫剂和战争毒剂急慢性中毒的诊断。在病情严重的肝炎患者中，约有五分之四的病人胆碱酯酶降低至正常的60%，危重病人可隆至正常的10%以内，甚至完全缺乏。另外，慢性活动型肝炎、肝硬化均可导致胆碱酯酶活力下降。胆碱酯酶测定主要用于有机磷中毒的诊疗和肝病的辅助诊断等。

1、有机磷杀虫剂是AchE及PchE的强烈抑制剂，故有机磷中毒时此酶活性明显降低，当PchE省略降低60%时，即有临床症状，降低80%时即有明显的神经肌肉症状，降至接近零时，患者必须用酶复合剂抢救，治疗有效时则逐渐恢复正常。

2、慢性活动性肝炎，肝硬化失代偿期胆碱酯酶活性明显降低。急性肝炎时PchE活力下降，疾病恢复时PchE迅速恢复正常，其升降幅度与白蛋白相平行。故胆碱酯酶测定对肝功能的估计及肝病的预后有一定价值。

3、饥饿，营养不良，贫血，烧伤，肺栓塞，皮肌炎，急性心肌梗死等PchE活性亦下降。

4、肾病综合征，甲状腺机能亢进，糖尿病及某些精神病患者PchE活力轻度升高。

5、脑实质破坏，脑脓肿，脑膜炎，脑肿瘤等CSF中PchE活力明显升高。羊水中PchE为5-70U/L，主要为PchE，其中AchE活性甚微。神经管缺陷胎儿的羊水AchE明显升高，同时测定羊水AFP对神经管缺陷诊断的准确率为99.4%。 

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