SOP文件 | 总胆红素(TBIL)钒酸盐氧化法操作规程与临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪  

原理：

样品中总胆红素在PH3.0附近，以及钒酸盐和表面活性剂作用下，可以被氧化成胆绿素。与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中总胆红素的浓度。

组成成分：

溶液A

枸橼酸盐缓冲液（PH2.9）………………………0.1M

溶液B

磷酸盐缓冲液（PH7.0）…………………………10mM

偏钒酸盐………………………………………… 4.0mM

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、溶血标本不能检测。

工作液的配制：

双液体试剂直接使用。

操作参数：    

波长：450nm      比色杯光径：1cm

测量：相对于空气     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	168μl
R3	42μl
标本	6.0μl

混匀，在波长450nm处，以空白管校零，读取各管吸光度。

线性范围：0～684μmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清

参考范围：5.1～19μmol/L

注意事项：

1、试剂与样本量可按生化分析仪要求按比例改变。

2、本试剂能抗抗坏血酸对测定的干扰，但溶血对测定有影响，若遇到溶血样本，请先做血清空白测试。

3、请勿将溶液A与溶液B混合成工作液使用。

4、胆红素对光敏感，标准及标本均应避光。

5、脂血及色素对测定有干扰，应尽量取空腹血。

6、胆红素大于171μmol/L的标本可减少标本用量，或用生理盐水稀释血清后重做。

贮存条件与有效期：

试剂于2℃～8℃避光保存，有效期为1年。

临床意义：

胆红素是由脾、肝脏和骨髓中的血红素裂解形成的。血清中有两种胆红素，即未结合胆红素（间接胆红素）和结合胆红素（直接胆红素）。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸形成可溶性复合物-结合胆红素，通过胆管分泌到胃和肠中。间接胆红素-与白蛋白结合的胆红素，也存在与循环中但不溶于水，不能通过肾脏排到尿液中。

血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。有血清或组织中胆红素浓度升高为黄疸。

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