SOP文件 | 直接胆红素(DBIL)钒酸盐氧化法操作规程及临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪 

原理：

样品中直接胆红素在PH3.0附近，以及钒酸盐和表面活性剂作用下，可以被氧化成胆绿素。与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中直接胆红素的浓度。

组成成分：

溶液A

枸橼酸盐缓冲液（PH2.9）………0.1M

溶液B

磷酸盐缓冲液（PH7.0）…………10mM

偏钒酸盐……………………………4.0mM

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

工作液的配制：

双液体试剂直接使用。

操作参数：    

波长：450nm       比色杯光径：1cm

测量：相对于空气    反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	168μl
R2	42μl
标本	6.0μl

混匀，在波长450nm处，以空白管校零，读取各管吸光度。

线性范围：0～342μmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：本

实验室采用省检验中心提供的质控血清

参考范围：0～6.8μmol/L

注意事项：

1、试剂与样本量可按生化分析仪要求按比例改变。

2、本试剂能抗抗坏血酸对测定的干扰，但溶血对测定有影响，若遇到溶血样本，请先做血清空白测试。

3、请勿将溶液A与溶液B混合成工作液使用。

贮存条件与有效期：

试剂于2℃～8℃避光保存，有效期为1年。

临床意义：

血清中有两类胆红素，即未结合胆红素和结合胆红素。结合胆红素即胆红素葡萄糖醛酸酯，又称自然保护区直接胆红素。胆道堵塞（如胆道结石、胆道肿瘤、先天性胆道闭锁等），肝脏疾病（如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝硬化等）均可导致血中胆红素升高。血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。

1、判断有无黄疸及其程度：

STB 17.1-34.2μmol/L为隐性黄疸；34.2-171μmol/L为轻度黄疸；171-342μmol/L为中度黄疸；>342μmol/L为重度黄疸。

2、判断黄疸的性质：

完全阻塞性黄疸为342-513μmol/L，不完全阻塞为171-266.8μmol/L，肝细胞性黄疸为17.1-119.7μmol/L,溶血性黄疸为<85.5μmol/L.

3、结合胆红素分类鉴别黄疸类型：

1）总胆红素和非结合胆红素增高，见于溶血性黄疸，血型不合的输血反应，恶性疟疾及新生儿黄疸等，以非结合胆红素增高为主；

2）总胆红素和结合胆红素增高为阻塞性黄疸，如胆石症，肝癌，胰头癌等，以结合胆红素增高为主；

3）总胆红素，结合胆红素，非结合胆红素均增高为肝细胞性黄疸，如急性黄疸性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化和急性肝坏死等。

4、用于肝细胞损害程度和预后判断：

在肝脏疾病中，胆红素浓度明显升高，常反映肝细胞损伤严重，预后不良。但少数亚急性肝炎可无黄疸出现。胆汁淤积性肝炎，血清胆红素甚高，而肝细胞受损程度较轻。

5、有助于了解新生儿溶血症的严重程度，制定合理的治疗方案。

6、再生障碍性贫血，慢性肾炎贫血患者STB减低。

有用，就点一个“在看” 吧戳原文，检验医学推荐用书！