SOP文件 | 亮氨酸氨基肽酶(LAP)速率法操作规程及临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪     

原理：

在PH7.2的Buffe中，上述反应游离出的 P-nitroanilide的速率，与LAP的活力成正比，在405nm波长下测定P-nitroanilide的上升速率，即可计算出LAP的活力。

组成成分：

Phosphate  Buffe  (PH7.2)

L-leucine-P-nitroanilide

非反应性稳定剂

标本：  

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

取R1冻干粉1瓶，完全溶于1瓶R2液体中，在室温中放置5分钟，即可使用。

操作参数：    

波长：405nm     比色杯光径：1cm

方法：速率法     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	200μl
标本	10.0μl

混匀，准确记录时间，放设定温度1分钟后在波长405nm处，以蒸馏水校零，计算△A/min。

计算：LAP（U/L） = △A/min × F

线性范围：0～500U/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清

参考范围：20～40U/L

注意事项：

1、本试剂线性范围可达到500U/L。如果样品中ICDH活性高于500U/L，可用0.85%NaCl溶液稀释样品后再重新测定，结果乘以稀释倍数。

2、试剂及样品的体积可按其比例扩大或缩小，计算公式不变。

3、试剂中含有NaN₃，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。

贮存条件与有效期：

原包装试剂储存在2℃～8℃至标签所示失效日期。

临床意义：

亮氨酸氨基肽酶（LAP），广泛分布于肝、肾、肠粘膜等部位，血清亮氨酸氨基肽酶（LAP）测定的诊断价值，主要是应用于肝胆疾病的诊断。也就是在肝、胆道疾患中升高。如：胆道闭塞症、胆石症、肝癌、肝硬变、急性肝炎等症升高。妊娠时随着月份的进展，亮氨酸氨基肽酶（LAP）也随之上升。

尿中亮氨酸氨基肽酶（LAP）的活性：在妊娠时直至分娩前升高，癌患者的尿的半数LAP增高，胆道闭塞症、急性肾疾患、肾病综合症等也升高。

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