SOP文件 | 谷氨酸脱氢酶(GLDH)速率法操作规程及临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪    

原理：

在上述反应中，NADH被氧化成NAD的速率与GLDH的活性成正比，在340nm波长下测定NADH的下降速率，即可计算出GLDH的活性。

组成成分：

R1A：三乙醇胺盐酸盐 Buffer

乙酸铵

R1B：NADH

R2：2-Oxoglutarate

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

R1：取R1A冻干粉一瓶，完全溶于一瓶R1B液体中，在室温中放置五分钟，即可使用。

R2：直接使用。

操作参数：    

波长：340nm      比色杯光径：1cm

测量：相对于空气     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	150μl
R3	38μl
标本	7.5μl

混匀，准确记录时间，放设定温度1分钟后在波长340nm处以蒸馏水校零，连续监测3分钟，计算△A/min。

计算：GLDH（U/L） = △A/min × F

线性范围：0～150U/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清

参考范围：

2～10U/L

注意事项：

1、试剂及样品的体积可按其比例扩大或缩小，计算公式不变。

2、试剂中含有NaN₃，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。

临床意义：

GLDH为肝线粒体特异性酶，它定位于肝细胞线粒体基质内，在肝细胞受到病毒、酒精、药物等损伤而发生坏死时可进入血流，使血清中GLDH活性明显升高，故测定GLDH活性，可作为诊断肝细胞病变，酒精及药物性肝损伤，特别是坏死型肝病的重要指标。另处，在肝硬化、肝肿瘤、胆道梗阻时，也有轻度升高。

由于GLDH与ALT或AST在肝内分布区域不同，计算AST或ALT/GLDH比值对肝脏病的鉴别有一定价值。

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