SOP文件 | 肌酸激酶(CK)NAC法操规程及临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪    

组成成分：

溶液A

咪唑缓冲液（PH6.5）………………100mM

醋酸镁…………………………………12mM

葡萄糖 ………………………………25mM

EDTA…………………………………2.5mM

AMP……………………………………13mM

ADP……………………………………2.5mM

NADP…………………………………2.5mM

5-磷酸二腺苷…………………………12.5μM

N-乙酰半胱氨酸（NAC）……………6.3mM

已糖激酶（HK）………………………≥3.5KU/L

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶………………≥2.5KU/L

溶液B

咪唑缓冲液（PH8.5）………………100mM

磷酸肌酸 ……………………………150mM

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

双液体试剂直接使用。

操作参数：    

波长：340nm      比色杯光径：1cm

测量：相对于空气      反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	160μl
R3	40μl
标本	4.0μl

混匀，准确记录时间，放设定温度2分钟后在波长340nm处，以蒸馏水校零，连续监测2-3分钟，计算△A/min。

计算：CK（U/L） = △A/min × F

线性范围：0～2000U/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清

参考范围：

25～196U/L

注意事项：

1、试剂与样本量可根据生化分析仪要求按比例改变。

2、本试剂线性可达到2000U/L。当样本中CK活力超过2000U/L时，可用生理盐水稀释，即0.1ml血清加0.2ml生理盐水，再测定，结果乘以3。

3、如试剂变混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于0.6，请勿使用。

临床意义：

在临床上主要用于诊断心肌梗塞。在进行性肌肉营养不良、多发性心肌炎、肌肉损伤、脑膜炎等此酶活性升高。

1、急性心肌梗死，发病2-4小时开始升高，12-48小时达到峰值，2-4天恢复正常，其升高程度较AST，LDH大，且出现早，与心肌损伤的程度基本一致，且心电图不易诊断的心内膜下心肌梗死和复发性心肌梗死时CK活性亦升高。动态监测有助于心肌梗死的病情观察和预后估计。

2、多发性肌炎，进行性肌营养不良，严重肌肉创伤等CK亦明显升高。

3、脑血管意外，脑膜炎，全身性惊厥，休克，破伤风等CK活性亦升高。

4、甲状腺功能低下，某些感染性疾病，恶性高热，剧烈运动，各种插管及手术，肌肉注射氯丙嗪，抗生素等CK亦增高。

5、甲状腺功能亢进，系统性红斑狼疮，慢性关节炎及应用类固醇制剂，避孕药和化疗可使CK活性降低。

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