生化SOP文件 | 尿素氮(BUN)UV-GLDH法操作规程及临床意义

应用仪器：全自动生化分析仪 

原理：

通过上述二步反应，使NADH氧化成NAD⁺，从而引起在波长340nm处吸光度下降，在固定间隔时间内吸光度下降值正比于样本中尿素氮含量。

组成成分：

溶液A

Tris缓冲液（PH8.50）……………………… 0.15M

α-酮戊二酸 ………………………………… 8.0mM

NADH …………………………………………0.2mM

溶液B

Tris缓冲液（PH8.50）……………………… 0.15M

脲酶 ………………………………………… ≥1.5KU/L

谷氨酸脱氢酶 ……………………………… ≥0.3KU/L

NADH………………………………………… 0.2mM

α-酮戊二酸 ………………………………… 8.0mM

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。
8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

双液体试剂直接使用。

操作参数：    

波长：340nm       比色杯光径：1cm

测量：相对于空气    反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	180μl
R3	60μl
标本	3.0μl

混匀后，准确记录时间，37℃1分钟后，在波长340nm处以蒸馏水校零，连续测定1～2分钟，读取空白管、样本管与标准管的△A/min。

计算：

线性范围：0～35.7mmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：2.86～8.2mmol/L

注意事项：

1、若试剂变混浊或以蒸馏水为空白，试剂在340nm处吸光度小于1.0时，请勿使用。

2、本试剂线性在尿素氮含量0～35.7mmol/L范围内，线性良好。当样本中尿素氮含量超过35.7mmol/L，请用生理盐水稀释，再测定，结果乘以稀释倍数。

3、胆红素，血红蛋白对测定的干扰可忽略。

贮存条件与有效期：

试剂于2℃～8℃避光保存，有效期为1年。

工作液在2℃～8℃避光保存，可稳定7天。

临床意义：

尿素氮是体内氨基酸分解代谢的最终产物之一。血中尿素氮来源于肝脏，通过肾脏随尿排出体外，测定血清中尿素氮的量可推测肾脏的排泄功能。

1、升高：

1）肾脏疾病如慢性肾炎、肾盂肾炎、肾动脉硬化、肾结核或肿瘤晚期。

2）肾前或肾后因素引起的尿量显著减少或尿闭，如脱水或循环功能衰竭等。

3）体内蛋白质分解过多，如消化道大出血、大面积烧伤等。

2、降低：

临床较少见。主要系肝实质受损，生成减少。如急性黄色肝萎缩，肝硬化，中毒性肝炎，严重贫血等。

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