生化SOP文件 | 高密度脂蛋白(HDL-C)化学修饰酶法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪    

原理：

胆固醇酯酶（CHER）和胆固醇氧化酶（CHOD）经化学修饰后，对LDL、VLDL、乳糜微粒的反应性就会低下。这种化学修饰的酶与葡萄糖硫酸钠、硫化环状糊精复合系并用时，使对LDL、VLDL、乳糜颗粒的酶反应性延迟，仅仅选择性地测定HDL-胆固醇。本试剂基于此原理，在第一反应中除HDL外使LDL、VLDL、乳糜微粒与葡萄糖硫酸钠、硫化环状糊精复合系结合，在第二反应中用化学修饰的CHER、CHOD无须分步直接测定HDL-胆固醇。

组成成分：

溶液A： 

抗坏血酸氧化酶 

HSDA

葡萄糖硫酸钠

MgSO₄·7H₂O

硫化环状糊精

稳定剂

戈氏缓冲剂（PH7.0）

溶液B：

胆固醇酯酶

过氧化物酶

胆固醇氧化酶

氨基安替比林（4-AA）

稳定剂

戈氏缓冲剂（PH7.0）

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、在采血前，至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定，测定前24小时内不应进行剧烈体育运动。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果24内不能完成检测即应将标本放入4℃冰箱保存一周，-20℃可保存数月。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

工作液的配制：

双液体试剂直接使用。

操作参数：    

波长：600nm        比色杯光径：1cm

测量：相对于空气     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	210μl
R3	70μl
标本	3.0μl

混匀，在波长600nm处，以空白管校零，读取各管吸光度。

线性范围：0～5mmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：0.83～1.97mmol/L

注意事项：

1、待检标本可能被乙肝病毒或艾滋病毒污染，操作时需要带手套防护。

2、试剂2含有叠氮化钠，误入口眼，或溅到皮肤时，必须采取充分水洗等紧急措施，必要时接受医生的治疗。

3、批号不同的试剂在检测中不要混用。

4、开封的试剂盖紧盖子按制定方法保管，过期试剂请勿使用。

5、本试剂请勿稀释使用，以免得到不正确结果，发生沉淀的试剂请勿使用。

临床意义：

血中HDL-胆固醇的测定，随着低HDL-胆固醇是缺血性心脏疾病的单独危险因子的流行病学调查报告以来，其血中浓度的增减作为动脉硬化的重要指标。也是评价冠心病的危险度的一个重要因素。

HDL-胆固醇升高能降低冠心病发生的危险，在TC中HDL-C占的比例越大，患冠心病危险性越小。而降低则是冠心病的先兆。在估计心血管病的危险因素中，HDL-C降低比Ch和TG升高更有意义。

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