生化SOP文件 | 低密度脂蛋白(LDL-C)选择性溶解法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪   

原理：

本测定法是在采用胆固醇酯酶（CHER）和胆固醇氧化酶（CHOD）的胆固醇测定系统中，使用仅选择性地使LDL溶解的表面活性剂，把LDL中含有的酯型胆固醇及游离型胆固醇诱导成胆固醇反应系统，以测定LDL-胆固醇。对LDL之外的脂蛋白（HDL、VLDL、乳糜微粒）的酶反应性，由于受到表面活性剂和糖化合物的阻碍而不反应，在反应液中以脂蛋白形式残存。基于这个原理，可以仅仅直接测定LDL-胆固醇。

组成成分：

溶液A：  

HSDA

稳定剂

戈氏缓冲剂

溶液B：  

胆固醇酯酶 

过氧化物酶

胆固醇氧化酶 

氨基安替比林（4-AA）

稳定剂

戈氏缓冲剂（PH7.0）

表面活性剂

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、在采血前，至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定，测定前24小时内不应进行剧烈体育运动。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果24内不能完成检测即应将标本放入4℃冰箱保存一周，-20℃可保存数月。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

工作液的配制：

双液体试剂直接使用。

操作参数：    

波长：600nm      比色杯光径：1cm

测量：相对于空气     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	210μl
R3	70μl
标本	2.8μl

混匀，在波长600nm处，以空白管校零，读取各管吸光度。

线性范围：0～18mmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清

参考范围：2.7～3.64mmol/L

注意事项：

1、待检标本可能被乙肝病毒或艾滋病毒污染，操作时需要带手套防护。

2、试剂2含有叠氮化钠，误入口眼，或溅到皮肤时，必须采取充分水洗等紧急措施，必要时接受医生的治疗。

3、批号不同的试剂在检测中不要混用。

4、开封的试剂盖紧盖子按制定方法保管，过期试剂请勿使用。

5、本试剂请勿稀释使用，以免得到不正确结果，发生沉淀的试剂请勿使用。

临床意义：

LDL血清脂蛋白中有很强的促进动脉硬化作用，LDL-胆固醇是冠状动脉疾病的重要危险因子，是诊断冠状动脉硬化的一个重要指标。

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