生化SOP文件 | α-淀粉酶(AMY)速率法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪    

原理：

底物CNP-C₃（2-氯-4-硝基苯-α-麦芽三糖）被α-淀粉酶直接水解产生CNP。在试剂与样品保温期间在405nm波长处测所产生的CNP。

组成成分：

MES缓冲液（PH6.0）……………………………50mol/L

氯化钠………………………………………………70mol/L

氯化钙………………………………………………6mol/L

活化剂………………………………………………900mol/L

CNP-G₃………………………………………………2.27mol/L

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

单试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：405nm      比色杯光径：1cm

方法：速率法       反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	266μl
标本	4.0μl

混匀，准确记录时间，放设定温度1分钟后在波长405nm处，在3分钟内测定每分钟光刻度变化值，计算△A/min。

计算：

AMY（U/L） = △A/min × F

线性范围：

0～1200U/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：

血：0～103U/L；尿：0-900U/L

注意事项：

1、试剂对外部污染（如唾液、汗水）很敏感，请戴手套操作，注意试剂瓶加盖。

2、试剂及样品的体积可按其比例扩大或缩小，计算公式不变。

3、试剂中含有NaN₃，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。

4、避免直接爆光。

贮存条件与有效期：

原包装试剂储存在2℃～8℃至标签所示失效日期。

临床意义：

淀粉酶能分解多糖，如淀粉和糖原。淀粉酶作用于多糖分子的α-1，4葡聚糖苷键，生成麦芽糖和葡萄糖。血清淀粉酶测定主要用于诊断急性胰腺炎，在急性发作期淀粉酶活性显著增高。

尿淀粉酶在发病后12-24小时也会升高。某些慢性胰腺疾病，如慢性胰腺炎、胰腺肿瘤以及流行腮腺炎、唾液腺化脓或腺管堵塞时，血清淀粉酶也会有所升高，而对于各种肝脏疾病，如肝炎、肝硬化、肝浓肿、肝癌及胆囊炎等，则淀粉酶活力下降。

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