生化SOP文件 | 免疫球蛋白G(IgG)免疫比浊法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪    

原理：

在340nm以终点法监测抗原、抗体反应。

组成成分：

溶液A：

PEG4缓冲液

含高分子强化剂的磷酸盐缓冲液

含有0.095%的叠氮化钠。

溶液B：

IgG抗血清

含有0.095%的叠氮化钠。

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

双液体试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：340nm     比色杯光径：1cm

测量：相对于空气    反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	250μl
R3	50μl
标本	10.0μl

用250μL PEG4缓冲液（R1）混合10μL的标本或标准液。读取在340nm处的标本和标准液的吸光度（OD1）。加入50μL的IgG抗血清（R3）。在37℃下放置5分钟。读取在340nm处的标本和标准液的吸光度（OD2）。

计算：

计算吸光度的差值（OD2-OD1），并建立标准液吸光度—浓度工作曲线。计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量。

线性范围：

0～30g/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：

6.8～14.45g/L

注意事项：

1、标准液所用的物质对HIV抗体，乙型肝炎表面抗原和丙型肝炎抗体测试呈阴性反应。

2、建议各实验室建立自己的正常值范围。

3、试剂中含有叠氮钠，避免眼睛可皮肤接触。如有接触，用大量水冲洗。

4、为准确测得免疫球蛋白含量，应于治疗之前取血检测，特别要在应用肾上腺皮质激素和丙种球蛋白之前。

5、为观察疗效可作追踪观察，各种分泌型骨髓瘤病人于治疗后其免疫球蛋白水平呈下降趋势，完全缓解时恢复到正常水平，治疗无效或复发时呈持续增高或重新增高。

6、婴幼儿 、儿童血清中免疫球蛋白含量较成人为低。

贮存条件与有效期：

1、原包装试剂2℃～8℃储存至标签所示失效日期。

2、避免污染，试剂在仪器中可稳定至少30天，不要冷冻。

临床意义：

免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）是一组具有抗体活性的蛋白质，存在于人体的血液、体液、外分泌液及某些细胞（如B淋巴细胞）膜上。应用免疫电泳和超速离心等方法，可将免疫球蛋白分为五类即IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。

IgG为人血清中含量最高的抗体，占血清中免疫球蛋白的70-80%。IgG是体内最主要的抗体，对各种病毒、细菌等都有抗体活性，它是唯一能够通过胎盘的免疫球蛋白，因而对胎儿抵御感染有着特殊的重要性。

1、免疫球蛋白增高

（1）多克隆性增高

即IgG、IgA、IgM均增高。常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤及某些自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。

（2）单克隆性增高

仅有某一种免疫球蛋白增高而其他种不增高或可见降低，主要见于免疫增殖性疾病。如分泌型多发性骨髓瘤，可分别见到IgG、IgA、IgD、IgE增高，据此可分为IgG型、IgA型、IgD型、IgE型骨髓瘤等。其中多为IgG型。

2、免疫球蛋白含量减低

见于各类先天性和获得性体液免疫缺陷病、联合免疫缺陷病的病人及长期应用免疫抑制剂的患者，此时五类免疫球蛋白含量均见减少。

有用，就点一个“在看” 吧戳原文，检验医学推荐用书！