生化SOP文件 | C-反应蛋白(CRP)免疫比浊法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪    

原理：在340nm以终点法监测抗原、抗体反应。

组成成分：

溶液A：

聚乙二醇………………………………<4%

氯化钠…………………………………106mmol/L

Tris/HCL缓冲液………………………15mmol/L

溶液B：

抗人CRP抗体

表面活性剂

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

双液体试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：340nm        比色杯光径：1cm

测量：相对于空气     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	250μl
R3	50μl
标本	10.0μl

线性范围：

0～20.0U/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：

0～1.0U/L

注意事项：

1、标准液所用的物质对HIV抗体，乙型肝炎表面抗原和丙型肝炎抗体测试呈阴性反应。

2、建议各实验室建立自己的正常值范围。

3、标本中的浑浊和微粒会影响测试结果，所以在测试前需用离心分离去除因不完全凝固和蛋白质变性造成的微粒。

4、试剂中含有叠氮钠，避免眼睛可皮肤接触。如有接触，用大量水冲洗。

贮存条件与有效期：

1、原包装试剂2℃～8℃储存至标签所示失效日期。

2、避免冷冻。

临床意义：

因具有同肺炎链球菌的C多糖结合能力而被称为CRP。其分子量为129KD，氨基酸组成与免疫球蛋白部分相似。肝脏为主要合成场所。在组织损伤后迅速增加，48小时可达到峰值，甚至可升至上千倍，并随损伤的恢复而下降。它广泛分布于人体的胸水、腹水、心包液、关节液、血液等处。

CRP是一组急性反应期蛋白中重要的一种。在各种急慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、手术创伤、放射性损伤等，病后数小时迅速升高，病变消退时又迅速降至正常水平，且不受放疗、化疗、皮质激素治疗影响。

1、在细菌性炎症中显著升高，病毒感染时CRP水平几乎无变化。因此，常用于细菌与非细菌性脑膜炎的鉴别诊断。

2、SLE患者易继发感染。临床表现与其活动气相似，血清CRP在活动期无显著变化，但继发感染时却明显升高，故对两者的鉴别诊断有重要意义。

3、CRP尚可用于检测风湿热的活动性，急性炎症期几乎处于高值状态，非活动期降低。

4、大部分急性心肌梗死病人CRP显著升高，且在所有急性反应期蛋白中，升高出现最早。

5、测定CRP还有助于对烧伤病人进行预后估计以及选择去痂和植皮时间。

6、对器官移植术后的病人在出现排斥时，CRP亦显著升高，因此是协助临床诊断排斥反应的有用指标。

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