生化SOP文件 | 糖化血红蛋白(HbA1C)免疫比浊法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪  

原理：

1、总血红蛋白（HB）的测定：

2、HbA_1C的测定建立在免疫抑制比浊法基础上。样本中HbA_1C与R1中的抗HbA_1C抗体反应生成可溶性的抗原-抗体复合物。加入R2启动反应。R1中过量的抗HbA_1C抗体与R2中的多半抗原反应生成不可溶的抗原-抗体复合物，吸光度的变化可通过比浊方法检测。

组成成分：

溶血剂：

缓冲液（PH7.4）………………0.02mmol/L

稳定剂

HB试剂：

磷酸缓冲液……………………0.02mmol/L

非离子变性剂

HbA_1CR1：

bA_1C抗体………………………>0.5mg/mL

MES缓冲液（PH6.2）…………0.025mmol/L

HbA_1CR2

多半抗原…………………………>8ug/ml

缓冲液（PH6.2）………………0.025mmol/L

标本收集：

EDTA或肝素抗凝全血，未处理的全血在2℃～8℃稳定6天，-20℃稳定6个月。

工作液的配制：

液体试剂可直接使用。

操作参数：

总血红蛋白的测定：    

波长600nm          比色杯光径：1cm

测量：相对于空气        反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	250μl
标本	19μl

混匀后，37℃水浴400秒钟，在波长600nm处比色，以空白管校零，读取样本管与标准管的吸光度。A_标准、A_样本。

糖化血红蛋白的测定：    

波长：700nm       比色杯光径：1cm

测量：相对于空气      反应温度：37℃

工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	125μl
R3	125μl
标本	5.0μl

样本+R1在37℃保温200秒，记录汲光度值A1，然后加R2在37℃保温300秒，记录汲光度值A2

计算：

线性范围：

0.3-2.0%

室内质控：

本实验室采用罗氏公司生产的定值质控。

参考范围：

3.6～6.0%

注意事项：

1、建议各实验室建立自己的正常范围。结果如超过14.7%，不用稀释样品，报告结果>14.7%

2、如仪器内无所提供波长的滤光片，选择波长接近的滤光片数值输入。

贮存条件与有效期：

1、所有试剂储存在2℃～8℃，至标签所示失效日期。

2、试剂在自动生化分析仪上冷藏可稳定16天。

临床意义：

此试验是用于评定糖尿病的控制程度，当糖尿病控制不佳时糖化血红蛋白浓度可高至正常2倍以上。因为糖化血红蛋白是血红蛋白生成后与糖类经非酶促结合而成的。它的合成过程是缓慢的，而且是相对不可逆的，持续于红细胞120d生命期中，其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比。因此，糖化血红蛋白所占比率能反映测定前1-2个月内平均血糖水平，现已成为反映糖尿病较长时间血糖控制水平的良好指标。

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