生化SOP文件 | 血清钙(CA)偶氮胂Ⅲ比色法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪

原理：

偶氮胂Ⅲ在碱性性下与钙离子形成稳定的有色络合物，在波660nm处，其吸光度与样本中钙含量成正比。

组成成分：

溶液A（碱性试剂）：

AMPD………………………………24g/L

溶液B（显色试剂）：

偶氮胂Ⅲ…………………………800mg/L

8-羟基喹啉………………………13.7mmol/L

二甲基亚砜………………………20g/L

标准液：

碳酸钙……………………………2.5mmol/L

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

双液体试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：660nm        比色杯光径：1cm

测量：相对于空气     反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	R1	180μl
R2	90μl
标本	3.0μl

混匀后，37℃水浴5分钟，在波长660nm处比色，以空白管校零，读取样本管与标准管的吸光度。A_标准、A_样本。

计算：

线性范围：0～3.75mmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：2.0～2.9mmol/L

注意事项：

1、试剂量与样本量可按不同的仪器需要按比例改变。

2、测试中所用试管、吸管及器皿都应用去离子水反复冲洗，以防微量钙污染。

3、本试剂在钙含量0～3.75mmol/L范围内线性良好。

贮存条件与有效期：

试剂于2℃～8℃避光保存，有效期为1年。

临床意义：

人体中的钙99%存在于骨骼中和牙齿中，大约1%存在于血液和软组织中。血清钙测定是钙代谢紊乱的诊断指标。

1、生理性降低:

青少年生长发育期、孕妇因需求量增加，老年人、胃肠功能不良者因吸收减少都会导致血钙降低，需及时补充钙。

2、病理性降低:

(1) 溶骨作用减弱，成骨作用增强，使血钙沉积于骨骼。

如甲状旁腺功能低下、甲状腺功能亢进症患者在手术后，其甲状旁腺功能低下，并伴有血钙在肠道和肾小管吸收减少。

(2) 肠道吸收减少。

如佝偻病、软骨病、胃肠道功能紊乱、严重乳糜泻等。

(3) 白蛋白减少，机体结合钙的能力降低，导致总钙降低。

如严重肝病、肾病综合症等。

(4) 大量输血者、血钙与抗凝剂结合形成不溶性复合物而沉积。

3、病理性升高:

(1) 溶骨作用增强，使骨钙大量入血。

如甲状旁腺功能亢进、甲状腺功能亢进、恶性肿瘤广泛骨转移、骨萎缩等，其中甲状旁腺功能亢进症还伴有钙在肠道和肾小管的重吸收增加。

(2)肠道吸收增多。

如维生素D增多症、结节病等。

(3)肾小管对钙的重吸收增加。

如应用噻嗪类利尿剂、乳-碱综合症等。

(4)机体结合钙的能力增强。

如多发性骨髓瘤、白蛋白增多症等。

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