生化SOP文件 | 无机磷(P)终点法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动生化分析仪  

原理：

无机磷和钼酸铵在酸性条件下反应生成磷酸钼酸络合物，该产物在波长340nm处，具有最大吸收峰，其吸光度与样品中无机磷浓度成正比。

组成成分：

钼酸铵………………………………1.00mmol/L

硫酸…………………………………220mmol/L

表面活性剂…………………………适量

标准液（磷酸二氢钾）……………1.29mmol/L

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、抽血后2小时内完成离心和冷藏。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

12、标本不能溶血。

工作液的配制：

单液体试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：340nm      比色杯光径：1cm

测量：相对于空气    反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	200μl
标本	4.0μl

分别混匀各管，设定时间5分钟，在波长340nm处，以空白管校零，读取各管的吸光度A_标准、A_样本。

计算：

线性范围：

0～4mmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：

0.81～1.55mmol/L

注意事项：

1、试剂量与样本量可按不同的仪器需要按比例改变。

2、若磷试剂出现浑浊现象，或空白吸光度大于0.60，请勿使用。

3、脂血及黄疸等，可产生假性增高结果，此时应采取样本空白吸光度校正之，样本空白取1.0ml生理盐水+样本0.02ml，混匀在340nm波长处读取吸光度。

4、本测定值超过4.0mmol/L，请用生理盐水将样本对倍稀释，然后再测定，结果乘以2。

5、本试剂具有腐蚀性，避免接触皮肤，如有污染，请用大量水冲洗，不要用嘴吸。

6、血浆中含磷量约为12mg/dl，而红细胞含磷量约为50mg/dl，因此测定血清无机磷时，应避免溶血。

贮存条件与有效期：

试剂于2℃～8℃避光保存，有效期为1年。

临床意义：

无机磷是人体中重要的组成物质。

血清中无机磷增高常见于甲状腺机能减退，慢性肾炎晚期磷酸盐排泄障碍及多发性骨髓瘤及骨折愈合期；血清无机磷降低，则多见于甲状腺机能亢进、佝偻病、软骨病等。

1、生理性变化：

夏季因紫外线照射可稍高于冬季，食入或注射大量维生素D及重体力劳动后也可升高。食糖过多及正常孕妇无机磷可降低。

2、病理性增高：

甲状旁腺功能减退，骨质愈合期，多发性骨髓瘤，粒细胞白血病，肾上腺皮质功能减退，肾功能障碍，急性肝坏死等。

3、病理性降低：

甲状旁腺功能亢进，维生素D缺乏，佝偻病，骨软化症，胰岛素治疗后，长期腹泻，重症糖尿病等。

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