介绍两个相似的大环，LOXO-195 & TPX-0005，设计思路与上上篇大环分子 -- 劳拉替尼类似，因此这里只简单介绍。TRK是这两个分子的共同靶点，该靶点近几年有两个药物上市，分别是Larotrectinib (2018年) & Entrectinib (2019年，靶点还包括ROS1、ALK)。TRK突变发生频率不高，但在多种肿瘤都有存在，给药后疗效一般较好，有人类比ALK，也将其称为“钻石突变”。
既然有了药物还要研发，这里的原因还是耐药突变。如图1[1]红圈所示，Larotrectinib(即LOXO-101，橘色分子) & Entrectinib(粉色分子)都会与TRK的SFM(solvent front mutation，TrkA中为G595R，TrkC中为G623R)突变有严重的clash，从而导致结合变弱，产生耐药。G667C(TrkA) & G696A(TrkC)是另一处突变，也会跟这两个药物有一定的clash，导致药效变差。
图1[1] 结构上看两个上市TRKi的耐药突变
橘色分子LOXO-101即Larotrectinib，粉色分子Entrectinib，二者都已上市。左侧蛋白为TrkA，右侧为TrkC。标绿残基为耐药突变，都与药物分子或多或少有clash。红圈指示两个药物与两个蛋白SFM(solvent front mutation)突变的clash。
这种耐药突变的机制比较清楚，解决的思路也比较明了，主要就是把分子引起clash的部分变小。但直接去掉那一部分通常会造成活性降低，因此要想办法找补活性，而大环化就是一种可行有效的手段。当然前提是能环得起来及放得下。目前主要的两个下一代分子是LOXO-195 & TPX-0005，它们应该都是以Larotrectinib为母版改构设计而来。LOXO-195与Larotrectinib主要研发公司都是Loxo Oncology(现隶属礼来)，TPX-0005研发公司则是前面Lorlatinib提到的Turning Point Therapeutics。LOXO-195主要靶向TRK，TPX-0005除靶向TRK，也靶向ROS1、ALK。
这两个分子目前没有公开的晶体结构，图2放的是model。两个分子的hinge-binding部分相同，有一个hinge-HB(3D截图的左侧靠上)，酰胺C=O有一个水介导的HB，其它部分没有明显的极性作用。
图2 基于现有晶体结构做的model
图中蛋白为TrkA，左侧小分子LOXO-195，右侧TPX-0005。左侧靠上有个hinge-HB，靠下有个水介导的HB。也有分子内氢键作用。
主要改造都是移除Larotrectinib伸向溶剂区的部分，也都做了大环化。原先Laro伸向溶剂区的部分对活性有帮助，那个羟基形成了两个HB，移除后需要想办法提高活性。经过合理大环化，活性不但保持而且有所提高。图3[2]是LOXO-195对比Larotrectinib的数据，无论对WT还是突变体，LOXO-195活性都有提高，尤其是对突变体，又尤其是对SFM类型突变。TPX-0005报道的活性比LOXO-195更好[3]，但选择性略微差些(对ROS1、ALK也有不错的活性)。
图3[2] Laro & LOXO-295酶活数据
最后，简单看下Turning Point的另两个在研分子。
TPX-0131是靶向ALK，TPX-0046是靶向RET，二者结构好像都没公布，但都是大环分子，也都是为解决耐药突变。图4[4, 5]中分子都以surface形式显示，只能看大概的结合模式。TPX-0131是比Lorlatinib更紧凑的大环，进一步减轻与耐药突变残基的clash。TPX-0046也是一个紧凑的大环分子，相比分子更大的上市药BLU-667(Pralsetinib，2020年) & LOXO-292(Selpercatinib，2020年)，在耐药方面确实应该更有优势，但不知选择性如何(已知对Src有抑制)。
图4a[4] TPX-0131与几个上市ALK抑制剂结合模式对比
图4b[5] TPX-0046与两个上市RET抑制剂结合模式对比
[1] ENA-0491/Poster No. 442: The development of LOXO-195, a second generation TRK kinase inhibitor that overcomes acquired resistance to first generation inhibitors in patients with TRK-fusion cancers
[2] Drilon, Alexander et al. “A Next-Generation TRK Kinase Inhibitor Overcomes Acquired Resistance to Prior TRK Kinase Inhibition in Patients with TRK Fusion-Positive Solid Tumors.” Cancer discovery vol. 7,9 (2017): 963-972.
[3] AACR-2019/Poster No. 442: Repotrectinib, a next generation TRK inhibitor, overcomes TRK resistance mutations including solvent front, gatekeeper and compound mutations
[4] AACR-2020/Poster: TPX-0131: A Next Generation Macrocyclic ALK Inhibitor That Overcomes ALK Resistant Mutations Refractory to Currently Approved ALK Inhibitors
[5] ASCO-2020/Poster: The Next-Generation RET Inhibitor TPX-0046 is Active in Drug-Resistant and Naïve RET-Driven Cancer Models