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【疯狂7月】⑫— KEGG通路标色-单组学 | 云平台

联川生物 2024-03-27

The following article is from HellsegaMosken Author HellsegaMosken

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前言

KEGG数据库是常用的通路数据库,在进行高通量测序数据分析时,我们经常希望能够在通路红标注出自己数据的表达/上下调情况。这里介绍一个轻松绘制的方法。

适用场景

1.在KEGG通路图中标记单(多)样本表达量;
2.在KEGG通路图中标记单(多)比较组上下调情况。

输入数据格式

第一列:

ID名,可接受多种ID类型。需要先确定您的ID是那种类型,并在参数栏选择对应的类型(如下图)。

第二~N列:

一列代表一个样本或比较组:若为样本,数据应该是表达量;若为比较组,数据应该是做了log2处理的差异倍数。

样本表达量 - 示例数据2:颜色变化代表表达量高低;
比较组log2(FC) - 示例数据1、3:log2处理使得上调数据大于0,下调数据小于0,于是颜色可以代表上下调情况。

若为单样本(或单比较组),作用是体现此通路中不同基因的表达量(上下调)情况
若为多样本(或多比较组),作用是比较不同样本(比较组)间的表达量(上下调)差异,效果见“示例数据3”。

以下是三种示例数据,供参考:

示例数据一:KEGG的蛋白编号(以K开头+5个数字);log2(FC)
示例数据二:Ensembl数据库的基因ID(以ENSG开头+11个数字);FC值(差异倍数)
示例数据三:基因名+三个比较组的log2(FC)

上传文件

点击“上传文件”出现上传控件,在此点击上传,可接受的文件格式有xlsx、rds和txt,示例数据点击图中的蓝色下载按钮即可下载。

上传的文件可以有冗余信息列,只要包含所需列即可:ID列(需确认该类型是否存在于参数“选择ID类型”列表中)+数据列(样本或者比较组均可,一列或者多列均可)。


开始分析

上传文件后,请务必确认ID类型和物种,然后点击“开始分析”

若物种或者ID类型选择错误,否则会因为ID不识别的问题而无法绘制,错误示范如下:

如果您的分析结果如上,没有任何标色,那么可能的原因是:

1.输入数据格式错误;
2.ID类型和物种选择错误;
3.您的数据在此通路确实没有匹配的。

结果解读

1.从图例可以看出,此图体现的是样本表达量,颜色代表表达量的高低。

2.从图例可以看出,此图体现的是比较组的log2(FC)值,即做了log2处理的差异倍数,由此,大于0的数代表上调,小于0的数代表下调,图例的绿灰红渐变正好可以直观展示上调数据为红色,下调数据为绿色。

3.从图例可以看出,此图也是差异倍数,不过我们可以注意到,每一个格子都被分成了三格:因为输入文件有三列数据列,所以都依次绘制在了图中,非常方便我们进行横向比较:


参数说明

全部可调参数如上:

选择通路:一次可画一张通路,可以全部通路都画完再点击下载,会把本次分析过的所有通路(点击过“开始分析”)都下载下来。同一个通路,只保留最后的绘制效果。

图例范围:可以自定义图例最大值和最小值以保证最佳的显色效果。

颜色设置:一般建议表达量用单色渐变(从0往上颜色渐深),log2(FC)值用三色渐变(下调一种颜色,上调一种颜色,同时颜色深浅还能体现差异大小)。


结果下载

可在此处设置输出文件名,默认以输入文件名作为输出文件名,非必填项。点击按钮即可打包下载。


解压后如下图,每个通路一幅图一张表,“分析记录”是标配,用于记录分析参数、分析方法、基础信息和引用语句。

云工具

网址:https://www.omicstudio.cn/tool/81


参考文献

Luo, W. and Brouwer, C., Pathview: an R/Bioconductor package for pathway based data integration and visualization. Bioinformatics, 2013, 29(14): 1830-1831, doi: 10.1093/bioinformatics/btt285


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