SOP文件 | BACT/ALERT3D60血培养仪标准操作规程

1 目的

规范BACT /ALERT3D60血培养仪标准操作规程，保证检验质量。

2 授权操作人员

经培训并考核通过的工作人员可操作仪器。

3 原理

培养瓶内的各种营养物质可提供微生物生长的物质基础，而微生物生长过程中的代谢产物之一CO₂将激活瓶内底部荧光感应物质而发出荧光，荧光信号变化与CO₂变化成正比。仪器瓶位内的探测器探测到该荧光信号的变化并经一组运算公式的运算，得出荧光信号变化的各种参数，从而判断培养瓶内是否有微生物生长。

4 工作环境

相对湿度：10% ~ 85%；环境温度：18 ~ 25℃；电源电压：110V，50/60Hz。

5 操作程序

5.1 培养瓶种类：标准需氧培养瓶、标准厌氧培养瓶、树脂需氧培养瓶、树脂厌氧培养瓶、树脂儿童培养瓶、含溶血素厌氧/真菌培养瓶、含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶。

5.2 开机

5.2.1 开机前检查电源系统、输出电压。

5.2.2 打开孵育箱。

5.2.3 打开UPS、控制组件、孵育组件和其他链接组件开关。

5.2.4 打开信息处理电脑。

5.2.5 系统启动并最终进入初始监视屏幕，待仪器通过自检，且温度达到要求即可开始使用。

5.3 培养瓶的装载

5.3.1 撕下培养瓶上的双条码之一，贴于送检样本登记本，以备查询。

5.3.2 按主屏幕上F3 Culture 键，出现装瓶界面。

5.3.3 按顺序输入检验号、样本条码、培养瓶条码。计算机自动指定培养瓶可放置的位置，按F10存盘。

5.3.4 打开孵育箱，用条码扫描仪扫条码面板“Vial Entry”。

5.3.5 扫描培养瓶条码，孵育架上有效瓶位指示灯亮，将培养瓶插入亮灯瓶位。

5.3.6 重复步骤5.2.4、5.2.5，加载其余培养瓶。听到三声“嘀”响确认培养瓶已加载完毕，关闭孵育箱门。

5.4 卸阴性瓶

主机对普通细菌培养的默认培养周期为5天，5天内如检测不到细菌生长，将作为阴性瓶处理，软件界面“Summary”与瓶位编号指示阴性瓶出现。

5.4.1 打开孵育箱，用条码扫描仪扫条码面板“Remove Negative”，阴性瓶所在位置瓶位指示灯亮。

5.4.2 依次取出阴性瓶，听到三声“嘀”响指示操作结束，关闭孵育箱门。

5.5 卸阳性瓶   

主机检测到阳性瓶后，软件界面“Summary”、瓶位编号以及主机外部“Positive Vial”均会给出阳性指示，并伴有报警声。

5.5.1 按F2消除报警声。

5.5.2 打开孵育箱，用条码扫描仪扫条码面板“Remove Positive”，阳性瓶所在位置瓶位指示灯亮。

5.5.3 依次取出阳性瓶，并扫描瓶上条码。听到三声“嘀”响指示操作结束，关闭孵育箱门。

5.6 阳性标本处理

5.6.1 用75%酒精消毒瓶口，颠倒混匀培养瓶数次。

5.6.2 将无菌注射器插入瓶口，抽取培养液接种于血平板，35℃、CO2培养18 ~ 24小时。

5.6.3 同时抽取少量培养液涂于玻片上作革兰染色镜检，结果作业危急值报告临床，并记录。

5.6.4 待培养出细菌后再做药敏试验并出具最终报告。

5.7 卸匿名瓶

培养瓶装载入机器时未扫描瓶上条码，仪器无法找到相关资料，因而报匿名瓶，软件界面“Summary”和瓶位编码均显示有“Anonymous”。

5.7.1 打开孵育箱，扫描门上“Identify anonymous”条码面板。

5.7.2 匿名瓶瓶位指示灯亮，取出匿名瓶，扫描瓶上条码，原瓶位指示灯亮。

5.7.3 放入培养瓶，听到三声“嘀”响指示操作结束，关闭孵育箱门。

5.8 错误瓶位与错误瓶的处理

当“Ongoing”的瓶位中培养瓶丢失或检测器发生故障时，系统报告Error Station，软件界面“Summary”、瓶位以及主机外部指示灯“System Error”均会有出错提示，并伴有报警声。

5.8.1 按F2消除报警声。

5.8.2 打开孵育箱，孵育架上错误瓶位指示灯亮，先确定培养瓶是否在指定瓶位上且完全插好。当培养瓶没有完全插好，或不在指定瓶位但可以立即找回时，将培养瓶放回指定瓶位并确认插好，扫描门上条码面板“Vial Return”，听到三声“嘀”响指示操作结束，关闭孵育箱门。

当培养瓶不在指定瓶位，而且不能找回时，扫描门上条码面板“Vial missing”，并将该瓶位设定为阴性。

当培养瓶在指定瓶位并完全插好时，可能时培养孔本身问题，则扫描门上条码面板“Bad Station”，封闭该瓶位。

5.9 培养瓶状态的人工设定

如果由于解决错误的需要，正在培养过程中的培养瓶状态可以进行人工设定。

5.9.1 按主屏幕上F3 Culture键。

5.9.2 在“Station”下输入需人工设定状态的培养瓶位置。

5.9.3 将光标移动到“Status”，当前显示状态为“Ongoing”。

5.9.4 按F9在计算机对话框提示下输入“N”（阴性）或“P”（阳性）。

5.9.5 按F10确认修改。

5.9.6 再按F10存盘。

5.9.7 如果设定为阴性瓶，则执行卸阴性瓶程序。

5.9.8 如果设定为阳性瓶，则执行卸阳性瓶程序。

5.10 生长曲线查询

5.10.1 按主屏幕上F4 Plot键。

5.10.2 在Plot station处输入要查询的瓶孔号。

5.10.3 按F10存盘，并开始查找符合条件的曲线图。

5.10.4 若屏幕提示“Complete”，按F4 View Plot查看。若屏幕提示“No Data”，按ESC退出。

5.11 关机

本仪器为24小时开机，无特殊情况不关机。当突然停电时，应将仪器关闭。

5.11.1 按Ctr F6。

5.11.2 按Ctr C。

5.11.3 关闭信息处理电脑。

5.11.4 关闭孵育箱门。

6 质量控制

6.1 检查仪器运行情况。

6.2 查看温度计温度与仪器监视器显示的温度（应在35±1.5℃），两者误差应＜0.5℃。查看环境温度与运行温度，并作好记录（见附表 ）。

6.3 血培养瓶的质控

6.3.1 外观检查  检查外观是否完整，有否破损，有否污染等。

6.3.2 无菌试验  每新进一批号或货号应做无菌试验。随机抽一只培养瓶，直接放入仪器培养，结果应是无菌生长。

7 维护及保养

7.1 日保养  查看仪器监视器温度与仪器内部温度计温度。清洁仪器及电脑外表面。

7.2 周保养  清洗仪器后部的空气过滤器。检查所有指示灯与报警信号状态。

7.2 月保养  检查仪器内温度计读数与显示屏显示的温度是否一致（误差<±0.50C），须保证仪器门关闭时间>2小时。清洁瓶孔；清洁检查区块。

7.3 年保养  由厂家进行一次全面保养。

8 校正

8.1 例行校正：瓶孔、温度的校正，至少每年1次。

8.2 故障校正：质控失控、监测指标失控时、移位、维修后需校正。

8.3 校正后验收：校正后，微生物实验室负责人对各项指标进行核实，达标后方可。

9 应急处理

9.1 温度失控的处理  温度降低可能是操作时门开启时间过长，关闭半小时以上，再观察。

9.2 出现不能解决的故障  应及时联系工程师处理并告知微生物实验室负责人。

10 注意事项

10.1 如遇停电，请将仪器电源开关关闭，等来电后，再重新开启仪器。

10.2 关门时应确认关紧。

10.3 装载、卸载瓶时应尽量快，避免开启时间过长。

10.4 少开窗户，随手关门，保持实验室干燥、洁净和安全。

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