SOP文件 | 生殖道标本细菌学检验标准操作规程
1 目的
规范生殖道标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。
2 适用范围
生殖道标本培养或涂片检查。
3 标本
3.1 标本类型：生殖道标本。
3.2 标本采集
3.2.1 女性：由临床医师用无菌棉拭采集阴道、宫颈分泌物。怀疑盆腔厌氧菌感染时，由医师用注射器从阴道后穹处穿刺抽取标本，立即床边接种于厌氧菌平板。
3.2.2 男性：翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，清水冲洗，采集尿道口分泌物。采集前列腺液时，先冲洗尿道和膀胱，用手指从肛门内按摩前列腺，使前列腺液溢出。
3.2.3 梅毒螺旋体标本：从外生殖器的硬下疳处蘸取渗出液，置于载玻片上，加盖玻片后立即送检。
3.3 标本拒收标准
3.3.1 申请单项目与标本不符。
3.3.2 标本不是用无菌容器留取。
4 试剂、仪器
4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3％触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。
4.2 VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定药敏卡、革兰阳性菌鉴定药敏卡、药敏纸片等，有效期及储存条件参见试剂说明书。
4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2培养箱等。
5 细菌鉴定和药敏质控
参见《质量管理程序》。
6 检验步骤
接收标本后，立即对标本进行编号、登记。
6.1 涂片检查
6.1.1 革兰染色镜检：观察阴道分泌物中有无细菌，以及细菌形态和染色性，尤其注意观察有无白细胞内外的革兰阴性双球菌（淋病奈瑟菌），以及有无覆盖大量革兰阴性菌的上皮细胞（线索细胞，提示可能有阴道加特纳菌感染）。
6.1.2 梅毒螺旋体涂片检查：直接暗视野检查，观察有无纤细、发亮、前后旋转的密螺旋体，或冯泰纳染色，观察有无棕黑色的密螺旋体。
6.2 分离培养
6.2.1 一般细菌培养：接种血琼脂平板和麦康凯琼脂平板，置5％ ~ 10％ CO2环境条件下，35℃培养18 ~ 24小时。
6.2.2 淋病奈瑟菌培养:接种于GC琼脂平板，置5％ ~ 10％ CO2条件下，35℃培养18 ~ 24小时，观察有无较小、灰白色、露滴状菌落形成，进一步生化鉴定。
6.2.3 阴道加特纳菌培养 接种于含5％羊血琼脂平板，在5％ ~ 10％CO2环境培养48小时，观察有无形成针尖大小（0.3~0.5mm）、圆形、光滑、不透明、不溶血（在人血或兔血琼脂平板上可出现β溶血）的菌落。
7 操作流程
8 结果报告
报告菌名和抗菌药物药敏试验结果。
9 注意事项
取阴道分泌物之前避免性生活、阴道冲洗和用药。
10 临床意义
正常的内生殖道是无菌的，而外生殖器（包括男性尿道口和女性阴道）有多种细菌寄生，如尿道口常见有葡萄球菌、类白喉棒状杆菌和非结核分枝杆菌等，阴道常见有乳杆菌、双歧杆菌、消化球菌等。查见病原菌提示有细菌感染，如急、慢性前列腺炎，睾丸炎，精囊炎，附睾炎，阴道炎，急、慢性淋病等。常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌等。
12 相关文件及记录表格
JYK-***-WSW*** 质量管理程序