瞄准耳聋基因疗法再发力！Akouos在B轮融资3个月后，再计划进行1亿美元的IPO | 医麦猛爆料

本文由医麦客原创，欢迎分享，转载须授权

2020年6月10日/医麦客新闻 eMedClub News/--6月9日，总部位于波士顿，致力于通过腺相关病毒（AAV）载体技术开发基因疗法的Akouos宣布，公司将计划于不久后进行1亿美元的首次公开募股（IPO）。Akouos表示，公司在上周已经向美国证券交易委员会提交了IPO招股说明书，计划以股份代号AKUS在纳斯达克证券交易所上市。

在此次IPO之前，Akouos公司在今年3月才进行了1.05亿美元的B轮融资，并于2018年8月，进行了5000万美元的A轮融资。

据悉，自成立至今，Akouos公司已筹集1.627亿美元，主要是用于推进其首款基因疗法AK-OTOF进入临床开发阶段，治疗因耳铁蛋白otoferlin (OTOF)基因突变而导致感觉神经性听力损失。除此之外，公司目前还拥有一系列基于AAV技术开发的基因疗法，用于治疗因基因突变导致的遗传性疾病，这些疗法均处于临床前开发阶段。

▲ Akouos公司的管线图（图片来源：Akouos官网）

耳聋基因疗法策略

听力丧失是最常见的感觉障碍之一，也是当今医学界面临的最大挑战之一，影响着世界6.8％的人口(约5亿人)，其中遗传性耳聋是新生儿常见的疾病，发病率大约1/1000，且80%是常染色体隐性遗传(DFNB)，20%为显性。目前解决耳聋的方法大多为使用助听器、振动声桥及人工耳蜗等物理方法，缺少根本性的治疗途径，至今还没有FDA批准的治疗方法，是一个严重未满足需求的领域。

目前，基因疗法的繁荣给越来越多的疾病领域带来了新的希望，尤其是对于有基因缺陷的遗传性疾病。听力丧失作为基因治疗的潜在适应症，具有一定的优势：

• 耳蜗高度隔室化，并通过血液-耳蜗屏障(BCB)与身体的其他部分隔离，被认为是一种"免疫豁免器官"。这极大程度地减少了治疗所需剂量(研究成本低)，以及药物渗漏到全身循环系统的风险，以减少不良免疫反应。

• 此外，耳蜗中的毛细胞和支持细胞通常不分裂，因此耳蜗中的细胞保持稳定，有望利用非整合型病毒载体(例如AAV)进行持续的转基因表达。

实际上，耳蜗中的毛细胞(HC)和支持细胞(SC)都有望作为基因治疗的靶标。其中HC分为外部HC(OHCs)，其放大声音，和内部HC(IHC)，其将声波转换为电信号。SC位于内部和外部HC之间，并将感觉上皮锚定到基底层，保护HC并维持其环境。

近一半的感觉神经性听力损失是由HCs和SCs基因突变引起的。一些关键耳聋基因主要在SCs中表达并具有功能，如GJB2，它影响SCs的间隙连接，是最常见的遗传性耳聋基因。

在哺乳动物中，非遗传性感觉神经性听力损失主要是由于噪音损伤、耳毒性药物或年龄引起的HC损失。虽然对HCs的损害在哺乳动物中被认为是永久性的，因为它们具有非常有限的HC再生能力，最近的研究表明SCs是有希望的内耳祖细胞，HC可以从中再生。因此，SCs是基因治疗的重要潜在靶标，不仅用于纠正遗传听觉缺陷，而且有望用于HC再生。

基于进化版AAV载体的AK-OTOF

AK-OTOF是一种基因疗法，主要用于修复由于OTOF基因突变而导致的感觉神经性听力损失。正常的OTOF功能会让耳朵的感觉细胞（也就是HC或SC）响应声音刺激而释放神经递质，从而激活听觉神经元；突变或无功能的OTOF则无法将听觉信号传递到大脑。

相应地，AK-OTOF就使用AAV载体将OTOF基因的健康拷贝传递至HCs，使患者在单次给药后能恢复长期的生理听力。AK-OTOF旨在通过促进耳蜗受损细胞中正常功能的OTOF蛋白的表达，治疗因OTOF基因突变而导致的感觉神经性耳聋患者，这些患者通常从出生起就患有严重的双侧耳聋。

据报道，感觉神经性听力损失是由内耳的感觉细胞或神经纤维功能障碍或损伤引起，常见于新生儿耳聋病例中，且影响了近1/4的65岁以上人群，是最常见的听力损失形式，也是最常见的感觉障碍之一。OTOF基因突变是导致遗传性听力丧失的主要原因，全世界约有20万人受到影响。

腺相关病毒（AAV）载体由于缺乏致病性和具有基因转移的可预测性，在基因治疗中获得了广泛关注。临床中，这些载体已表现出为脊髓性肌萎缩、血友病和遗传性失明等疾病的治疗提供基因转移的能力。

而Akouos使用的是AAV的进化版本，它拥有联合创始人、哈佛医学院眼科教授Luk Vandenberghe博士开发的Ancestral AAV（AAVAnc）技术平台。AAVAnc具有天然存在的AAV及其变体的几个特征，但AAVAnc是完全人造的，不会在自然界中存在。

 ▲ Luk Vandenberghe（图片来源：Xconomy）

与目前正在开发的其它病毒载体相比，AAVAnc载体平台具有克服先天性免疫力的潜力，以便解决针对更广泛的患者群体的未满足需求的疾病。其中，Anc80是AAV1,2,3,6,7,8,9和rh.10的推定祖先，也被认为是该技术平台的40,000种新型AAVAnc组合中最先进的基因治疗载体，并且此前已授权Selecta Biosciences用于特定适应症，包括甲基丙二酸血症。另外，Anc80L65已被证明能高效地转化内耳感觉细胞中，并能转化之前认为AAV不可及的耳蜗细胞类型。

耳聋基因治疗研发进展

除了Akouos的AK-OTOF疗法外，目前关于耳聋的基因疗法还存在着以下的一些研究：

（1）6月3日，基因编辑大牛David Liu（刘如谦）团队通过新型的单碱基基因编辑技术以及双AAV载体递送技术，成功恢复了因Tmc1基因突变的耳聋小鼠听力，并在Science Translational Medicine 杂志上发表了相关研究。

推荐阅读（Tmc1基因突变耳聋疗法的曲折研究史）：突破！David Liu开发新型单碱基编辑技术，成功治疗隐性基因突变导致的耳聋 | 医麦猛爆料

（2）2019年8月，由上海科技大学钟桂生课题组、东南大学柴人杰课题组与复旦大学附属眼耳鼻喉科医院李华伟课题组，合作开发的一种新型AAV变体AAV-ie，表示可用于小鼠内耳中的基因递送。其具有安全感染小鼠耳蜗支持细胞(SCs)和毛细胞(HCs)的能力，且具有较高的感染效率，代表了对传统AAV血清型的巨大改进。相关研究发表在权威期刊Nature Communications上。

（3）2019年7月，美国哈佛医学院和波士顿儿童医院的研究人员利用优化的CRISPR/Cas9基因编辑系统，在耳聋小鼠模型（贝多芬小鼠模型）上精确识别并修正内耳的致聋突变，帮助小鼠挽救听力，而且在成功地做到这一点的同时没有产生任何明显的脱靶效应。研究成果发表在学术期刊Nature Medicine上。

（4）2019年2月，法国科学家通过称为双AAV的策略，使用了两种不同的重组AAV载体，一种携带otoferlin cDNA的5'-片段(OTOF NT, 核苷酸1-2,448)，另一种携带3'-片段(OTOF CT, 核苷酸2,449-5,979)，两种载体能够通过其反向末端重复重组并产生多联体，并且所得转录物可以正确剪接产生蛋白质OTOF。该研究中的基因治疗不仅成功地防止正在发育的耳蜗发生OTOF耳聋，并且能够在耳蜗完全发育后，通过持续给药的方式逆转耳聋表型。

（5）诺华公司的一种基于AAV的基因疗法CGF166已进入1/2期临床阶段，它是通过一种含有编码人Atonal转录因子（Hath1）的cDNA的重组腺病毒5（Ad5）载体，将Aton1基因输送到内耳来治疗双耳重度到极重度耳聋。研究表明，耳毛细胞的生长受Atonal控制，该基因可作为一种“主开关”，通常在出生后关闭，而CGF166能将开关拨到“开”位置，从而刺激正常听力所需的毛细胞生长。

（6）另外，位于波士顿的Decibel Therapeutics正在研究针对内耳中毛细胞的治疗策略，以解决先天性听力丧失或与年龄有关的平衡障碍。其治疗先天性耳聋的AAV基因疗法DB-OTO和DB-201目前处于临床前药物发现阶段。

就以上针对耳聋基因疗法进行的临床试验和药物开发而言，我们不难发现，在基因疗法领域，腺相关病毒（AAV）已经成为基因递送载体中不可或缺的工具之一，这一技术逐渐在医药领域占据一席之地。

课堂推荐

近年来溶瘤病毒、病毒载体和新型疫苗的研发项目越来越多，这些新型的生物制品很多都需要通过贴壁细胞培养生产。传统的工艺贴壁细胞通常通过T-Flask、滚瓶、细胞工厂等进行培养，培养规模相对有限，且很难进行工艺放大。使用微载体结合一次性的生物反应器进行贴壁细胞培养，是一种很好的解决方案。

下期医麦课堂将邀请Cytiva Fast Trak工艺开发实验室的上游经理高级工程师杨建军博士做客，与大家分享使用微载体结合一次性的生物反应器进行贴壁细胞培养的解决方案。

干货满满，不容错过！

2020年6月11日（周四）

20:00-21:00

▼

杨建军博士，Cytiva Fast Trak工艺开发实验室的上游经理高级工程师。主要从事上游工艺开发、工艺放大和培训的工作。曾开发过的工艺包括高密度大肠杆菌生产质粒、HEK293T细胞微载体放大培养生产病毒载体、高密度微载体灌流培养生产疫苗、TFF高密度灌流培养生产激酶和抗体等项目。对多种类型的悬浮细胞和贴壁细胞的放大培养均较为熟悉。

参考资料：

1.https://www.biospace.com/article/akouos-eyes-100-million-ipo-to-support-gene-therapy-programs-for-hearing-loss/

2.Akouos官网

医麦客近期热门报道

点击“阅读原文”，注册报名！