通过“挤压细胞”将5种mRNA递送至多种免疫细胞对抗实体瘤

来源：前沿Biotherapy

排版：Vergil

SQZ Biotechnologies是一家临床阶段的生物技术公司，专注于释放细胞疗法的全部潜力。该公司专有的“细胞挤压”Cell Squeeze®技术提供了将多种生物材料递送到许多患者细胞类型中的独特能力，以设计公司认为可以成为广泛潜在疗法的方法。

该公司宣称，其细胞挤压技术平台可实现高效率的体外细胞工程化改造。通过消除对病毒载体和电穿孔技术以及细胞扩增的依赖，突破制造壁垒，在 24 小时内快速可靠地生产 SQZ® 细胞治疗候选药物。

2022年12月，美国FDA授予SQZ Biotech其用于治疗HPV16阳性晚期或转移性实体肿瘤的增强型抗原呈递细胞(eAPC)候选药物SQZ-eAPC-HPV的快速通道指定。

该公司还在2022年欧洲肿瘤内科学会免疫肿瘤大会(ESMO-IO)上展示了SQZ-PBMC-HPV以及SQZ-eAPC-HPV两款细胞疗法的最新临床数据。

SQZ-PBMC-HPV是该公司基于SQZ APCs（抗原呈递细胞）平台研发，通过将靶抗原封装在APC细胞中，诱导针对这一抗原的特异性T细胞应答。具体而言，SQZ-PBMC-HPV通过将HPV16病毒E6和E7蛋白相关抗原封装在外周血单核细胞中（PBMCs）制备而成。

根据此次最新数据显示，SQZ-PBMC-HPV在HPV16阳性晚期或转移性实体瘤中，采用推荐II期剂量（RP2D）的SQZ-PBMC-HPV进行单药治疗以及与检查点抑制剂联合治疗的初步生物标志物和安全性结果显示：

SQZ-PBMC-HPV能够刺激部分患者的抗肿瘤免疫反应。在MHCI表达升高的情况下，CD8肿瘤浸润增加连同E6(和E7)表达细胞减少与抗原特异性杀伤的生物标志物标记一致。而在安全性方面，SQZ-PBMC-HPV无论是单药治疗还是与检查点抑制剂联合治疗中安全和耐受性良好。其安全性特征主要包括低级别(1级和2级)非特异性不良事件，且未观察到剂量限制性毒性以及药物相关的严重不良事件。

而另一候选疗法SQZ-eAPC-HPV是基于该公司的第二代细胞治疗平台SQZ eAPCs同时将5种不同的mRNA递送到患者的单核细胞、T细胞、B细胞和自然杀伤（NK）细胞中，一步完成赋予4种不同细胞5个不同功能。临床前研究结果显示，SQZ-eAPCs能够通过同时表达抗原、CD86、膜结合的IL-2和IL-12，对多种抗原（包括HPV16蛋白）产生强大的CD8阳性T细胞应答。

目前，该疗法被开发主要用于治疗晚期或转移性HPV16+实体瘤，同时，该公司也在扩展其适应症，旨在针对慢性乙型肝炎病毒，但目前还处于临床前研发阶段。

而根据本次SQZ-eAPC-HPV在治疗晚期或转移性HPV16+实体瘤患者的的I/II期临床试验COMMANDER-001剂量递增/扩大研究的初始安全性数据显示：

队列1中4名患者都未观察到剂量限制毒性，且未报告相关的严重不良事件。此外，4例可评估患者中有2例观察到疾病长期稳定，其中1例患者具有明显的药效学缓解。

整体而言，ESMO-IO大会上所展示的临床数据表明，其APC和eAPC候选治疗药物在接受治疗的患者中耐受性良好，且在两项临床试验中，所有批次的中值存活率都超过了90%。

独特的“细胞挤压”技术平台

目前大多数细胞疗法是通过病毒载体或电穿孔技术将治疗物质送入细胞，而SQZ开发的“细胞挤压”技术，其原理是通过微流控芯片以高速物理方式挤压细胞，暂时打开细胞膜，将特异性抗原在细胞膜重新闭合前扩散到细胞中。目前，SQZ已开发出了数十种芯片来挤压不同大小的细胞，从而可以在不依靠病毒载体的情况下，完成对细胞的基因工程改造。

该平台技术是利用物理方法来打破细胞膜，因此可以大大提高细胞疗法的安全性，而且基于这种物理递送方法不仅操作简单、效率高、而且成本也较低，最重要的是，因其本身不涵盖化学成分及其他生物成分，所以相应也不会带来额外的副作用问题。

在2018年11月发表在PNAS上的一篇题为“Cell engineering with microfluidic squeezing preserves functionality of primary immune cells in vivo”的研究论文中，研究人员将SQZ细胞挤压技术平台与传统电穿孔转染方法进行了比较，结果发现使用“挤压”技术对细胞基因表达的影响更小，能够保存细胞的正常功能。

该技术在疗效上也显示出优势，通过使用“挤压”技术和电穿孔技术编辑T细胞中编码PD-1的基因，在小鼠肿瘤模型中检验这些细胞的疗效发现，使用“挤压”技术编辑的T细胞在肿瘤模型中表现出更强的疗效，导致肿瘤生长速度显著减慢。

此外，在生产方面SQZ也据有独特优势，其生产时间仅不到24小时，SQZ技术不需要对患者进行“预处理”，从而缩短了住院时间，且能够最大限度地减少对正常细胞的意外干扰和影响，并不改变细胞基因，避免了因DNA破坏而产生的长期安全性问题。

依托其特有的细胞挤压技术，该公司还开发了SQZ AACs（活化抗原载体）和SQZ TACs（耐受性抗原载体）这两大平台，同时基于这项独特的技术建立了广泛的产品管线，主要用于治疗肿瘤、传染病和自身免疫疾病等。

SQZ AACs平台和SQZ APCs平台技术原理类似，不同的是SQZ AACs是通过用抗原挤压红细胞（RBC）并激活佐剂而产生的。经过改造的红细胞输入患者体内后，SQZ AACs通过一种自然过程迅速被专业的抗原呈递细胞吸收，以破坏体内衰老的红细胞。为了利用这一过程，SQZ AACs被设计成一个“特洛伊木马”，将大量的抗原和活化因子输送到淋巴器官内的内源性抗原呈递细胞，以诱导针对这一抗原的特异性T细胞应答。

目前，利用SQZ AACs平台开发的第一个候选产品SQZ-AAC-HPV肿瘤疫苗，主要用于治疗HPV阳性肿瘤。在临床前研究中，小鼠模型中的SQZ AACs已经显示出了强大的免疫应答、CD8 T细胞浸润和相关肿瘤减少。

SQZ-AAC-HPV正在一项多中心、开放性1期临床研究中进行研究，以评估其在HPV16+复发、局部晚期或转移性实体瘤的HLA-A*02+患者中作为单一疗法以及与免疫检查点抑制剂联合使用的安全性和耐受性、免疫原性效果、抗肿瘤活性和药效学。值得一提的是，今年1月，该公司在国内申报了临床，并已获得CDE临床默示许可。

来源：CDE官网

SQZ TACsSQZ TACs平台通过用特异性抗原挤压红细胞（RBC）形成TACs，输入患者体内后，当人体对RBC进行破坏处理时，TACs中的成分会以一种耐受性的方式呈现，阻止免疫系统攻击自己的红细胞。SQZ TACs平台还处于临床前研发阶段，主要用于自身免疫性疾病的治疗。

结语

近些年来，细胞疗法和基因疗法不断取得新突破。但目前很多细胞疗法所使用的基因编辑技术依赖于病毒载体（如腺相关病毒等），来完成目标基因递送。这些病毒载体面临着成本过高、周期过长、可转导的细胞类型有限、非特异性插入等局限。而SQZ公司采用新颖的“挤压”细胞的技术路线，具有独特的技术优势，期待这一技术将释放更多潜力，带来一种更全新的细胞疗法，造福患者。

值得注意的是，尽管HPV 16阳性实体瘤项目的临床I期数据良好，但在上个月罗氏(Roche)宣布将不再对该项目行使期权，而SQZ也开始寻求新的替代合作伙伴关系。该公司在2022年度裁员60%似乎也是个不好的信号，不知是否会步溶瘤病毒疗法公司Oncorus的后尘。

参考资料

1.https://www.biospace.com/article/releases/sqz-biotechnologies-receives-fda-fast-track-designation-for-its-eapc-therapeutic-candidate-for-treatment-of-hpv16-tumors/

2.https://www.pnas.org/doi/full/10.1073/pnas.1809671115

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