生化SOP文件 | 总胆固醇(T-CHOL)终点法操作规程及临床应用

应用仪器：

全自动生化分析仪   

原理：

在505nm波长测得的吸光度的增加值与样品中总胆固醇的浓度成正比。

组成成分：

TRIS缓冲液（PH7.3）……………………………50.0mmol/L

酚……………………………………………………6.0mmol/L

胆固醇酯酶…………………………………………≥0.400KU/L

4-氨基安替吡啉……………………………………0.3mmol/L

胆固醇氧化酶………………………………………≥0.200KU/L

过氧化物酶…………………………………………≥4.0KU/L

标本：

1、用真空采样管采集所有血液标本。

2、离心前使标本完全自然形成凝块。

3、保持样品管的密闭状态。

4、在采血前，至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定，测定前24小时内不应进行剧烈体育运动。

5、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

6、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

7、如果24内不能完成检测即应将标本放入4℃冰箱保存一周，-20℃可保存数月。

8、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

9、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

10、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

11、标本不能溶血。

工作液的配制：

液体单试剂可直接使用。

操作参数：    

波长：505nm         比色杯光径：1cm

测量：相对于空气      反应温度：37℃

操作步骤：工作液和比色杯保温到37℃；实验期间温度应恒定在37℃±0.5℃

	微量
工作液	260μl
标本	3.0μl

样品与试剂混和后在室温入置10分钟（在37℃可缩短保温时间）后，以试剂空白校零测吸光度

计算：

线性范围：

0～20mmol/L

较准品：  

本实验室采用罗氏公司生产的定值血清。

室内质控：

本实验室采用省检验中心提供的质控血清。

参考范围：

3.6～6.5mmol/L

注意事项：

1、本试剂含有叠氮钠（0.095%）防腐剂，切勿吞下并避免与皮肤和粘膜接触。

2、样品中胆红素浓度不超过349umol/L，血红蛋白不超过124umol/L时对本法无干扰。

3、开封的试剂盖紧盖子按制定方法保管，过期试剂请勿使用。

临床意义：

胆固醇是脂类代谢的中间产物。血中的胆固醇有两种类型，一种是中和脂肪酸结合，称为胆固醇酯，另一类是未和脂肪酸结合的，称为游离胆固醇。

高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确的关系，与冠心病的关系已经得到广泛的共识。降低血清胆固醇可降低冠心病的发病率及防止粥样斑块的发展。血清胆固醇水平受年龄、性别等影响，如测定结果属临界值的患者，同时存在冠心病或伴有其它两个冠心病危险因素时，则应进行脂蛋白的分型，包括测定TG、HDL、LDL。

（1）TC增高：

高总胆固醇是冠心病的主要危险因素之一，有原发和继发两种，原发常由遗传因素引起，继发的可见于动脉粥样硬化，Ⅰ～Ⅴ型高血压症、肾病综合症、甲状腺功能减退症、糖尿病活动期、肥胖、阻塞性黄疸。

（2）TC减低：

低总胆固醇也有原发和继发两种，前者常由遗传因素引起，后者如甲脏腺功能亢进、营养不良、慢性消耗性疾病、恶性贫血、溶血性贫血。

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