SOP文件 | 血清钙(Ca)干化学比色法操作规程及临床意义

应用仪器：

全自动干式生化分析仪

原理：

Vitros Ca试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。将一滴10μl的患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。于是钙离子从附着的蛋白质上游离出来，透过分布层进入下面的试剂层，与砷Ⅲ染色剂生成有色复合物，使最大吸收峰发生改变。

经过一段孵育期，有色复合物的反射强度可通过光谱法测定。所产生有色复合物的总量与样品中的钙含量是成正比的。

干片成分：

反应成份有砷Ⅲ染色剂。其它成份有染色物质，粘合剂，缓冲剂，稳定剂，表面活性剂，交叉连接剂和媒染剂。

标本的采集和制备：

1、标本收集：

可测试的样品种类有：血清、肝素锂/钠抗凝血浆。

不能测试的样品有：采样管含EDTA，氟化物，草酸或枸橼酸的样品，因为这些物质会与钙螯合而使结果产生负偏差。此外，接受EDTA治疗的患者血样也不能测试。

特别要注意的是：臣床患者的结果会偏低3%；淤血的钙浓度会偏高15%。

2、样品收集和制备：

根据实验室的标准程序采集样品。

（1）、用真空采样管采集所有血液标本。

（2）、离心前使标本完全自然形成凝块。

（3）、保持样品管的密闭状态。

（4）、样品采集后2天内要离心标本，吸出血清。

（5）、血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。

（6）、去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。

（7）、如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。

（8）、标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。不要用水浴方法复溶标本。

（9）、吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。

（10）、含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质（分离胶）的可以不再离心。

（11）、如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。

（12）、标本不能溶血。

3、标本处理和保存：

处理标本时要将其当成生物污染品；标本要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

如果测试时间拖延超过4小时，要将样品冷藏在2℃～8℃；-18℃下冷冻可长期保存。

测定方式：

比色法

测定波长：

680nm 

测试时间和温度：

37℃约5分钟

样品用量：

10μl

反应过程：

线性范围：

0.25～3.49mmol/L

室内质控：

本实验室采用试剂配套质控用品。

校准液：

本实验室采用试剂配套校准血清。

参考范围：

2.10～2.55mmol/L

注意事项：

不加盖的样品杯放在室温下，由于二氧化碳丢失而使样品的PH值升高，会使钙的测试结果最多偏高0.1 mmol/L。为减少此类误差，可在厌氧环境下处理样品并尽快测试，这种情况对量少的小儿样品尤其重要。有些药物和患者的自身状况也会影响钙的测试值。

贮存条件与有效期：

未开封的干片盒：存储在2℃～8℃。

在机内干片储藏器中的干片盒：

（1）在仪器上放置时间不能超过4周，否则要更换新试剂。

（2）当仪器关闭时间不超过2个小时时，可将干片盒留在储藏器中。

临床意义：

人体中的钙99%存在于骨骼中和牙齿中，大约1%存在于血液和软组织中。血清钙测定是钙代谢紊乱的诊断指标。

血清钙增高常见于甲状腺机能亢进、骨病等；血清钙降低常见于甲状机能降低，钙及维生素D吸收不良等症。

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