道尔生物技术全梳理

▎Armstrong

道尔生物成立于2014年，创始人黄岩山博士在华东医药（后加入子公司九源基因）工作长达15年，2008年离开华东医药加入泰康生物。职业生涯主要聚焦于蛋白药物的开发。

道尔生物的主要技术特色包括长效蛋白、多功能蛋白和多特异性纳米抗体等。

xLONGylation：模拟PEG，与PAS类似的PAE技术

Fc融合、白蛋白融合、PEG融合、XTEN融合、弹性蛋白ELP融合等是常用的蛋白长效化技术。PAS是一种通过蛋白模拟PEG的技术，增加水化半径、延长半衰期。PAS技术由慕尼黑科技大学的科学家发明，简言之是一种有富含P（脯氨酸）、A（丙氨酸）S（丝氨酸）的重组蛋白。

PAS技术可以用于多种药物结构形式，通过调整PAS蛋白的长度可以调整半衰期长短，具有很大的灵活性。

xLONGylation技术是类似于PAS的一种长效化技术，富含P（脯氨酸）、 A（丙氨酸）、E（谷氨酸）的重组蛋白，类比于PAS也可以称为PAE技术。PAS或PAE技术还具有高渗透长滞留效应（enhanced permeability and retention effect，缩写EPR） ，一些特定大小的大分子物质（如脂质体、纳米颗粒以及一些大分子药物）更容易渗透进入肿瘤组织并长期滞留的现象。

MultipleBody：纳米双抗

道尔生物的双特异性抗体基于纳米抗体构建，严格的说纳米双抗并不需要底层技术，可以相对简单的进行融合。长效方面可以融合到Fc上，也可以融合到抗HSA的纳米抗体上（赛诺菲旗下Ablynx即采用这种方式）。康宁杰瑞PD-L1/CTLA-4纳米双抗采用串联纳米抗体融合到Fc，金斯瑞（SMAB）、洛启生物等也在开发纳米双抗。

除此外，和铂医药、百奥赛图的重链抗体小鼠产生的单域抗体，同样可以采用类似的方式构建双抗。

AccuBody：前抗体技术

Accubody为一种前抗体技术，即通过一段PAE（xLONG）屏蔽抗体不与抗原结合，在肿瘤组织内被TME特异性的酶切掉xLONG之后，才能结合抗原。Cytomx的Probody、天演药业的SAFEbody均是类似的屏蔽肽技术，采用的酶切位点也都是uPA。不同的是，Accubody采用的不是屏蔽肽，而是xLONG，同时起到富集到肿瘤组织的作用。

下表为道尔生物的研发管线和国内竞争格局。

在研药物：代谢病、癌症、眼病等

GLP-1、GIP、GcG、FGF21在糖尿病、肥胖、脂肪性肝病的研究越来越热，围绕这些靶点构建的多功能蛋白成为一个竞争热点。如礼来、赛诺菲等构建GLP-1/GcG/GIP双靶点或三靶点激动剂，Yuhan构建了GLP-1/FGF21双功能蛋白，2019年7月勃林格殷格翰以4000万美元+8.3亿美元里程碑金额获得授权。信达生物引进了礼来GLP-1/GcG双功能蛋白，道尔生物构建了GLP-1/GcG/FGF三功能蛋白，结构如下图所示，GLP-1/GcG嵌合多肽融合到Fc的N端，FGF21融合到Fc的C端。

Claudin18.2是道尔生物肿瘤药的一个重要布局靶点，同时开发了单抗和双抗。安进的Claudin 18.2/CD3双抗AMG 910已经申报临床，采用安进HLE BiTE串联scFv融合单链Fc的结构形式。道尔生物Claudin 18.2/CD3双抗采用纳米双抗融合抗HSA纳米抗体（延长半衰期）的三价纳米抗体形式，与Ablynx纳米双抗的结构形式相同。

PD-L1/TGFβ是近年来国内跟踪研发的又一个热门双抗靶点，恒瑞医药、普米斯生物（基于纳米抗体）已经申报临床，创胜集团、和铂医药、乐普生物等在研。泽璟制药、盛诺基、道尔生物则在此基础上进一步整合第三个靶点。盛诺基SNG2003为融合了某种白介素（可能为IL-2、IL-15之类）的三功能抗体，白介素IL-y起到增强免疫响应的作用。

道尔生物则构建了PD-L1/VEGF/TGFβ三特异性抗体，同样在其基于纳米抗体的MultipleBody技术平台上构建。罗氏PD-L1抗体与VEGF抗体的联用已经获得FDA批准一线治疗，国内中山康方等开发了PD-1/VEGF双抗，长春金赛、宜明昂科开发了PD-L1抗体/VEGFR融合蛋白。也就是说，PD-L1与VEGF、PD-L1与TGFβ均证明了协同效应，这可能也是道尔三靶点组合的设计思路。同GLP-1、GcG、GIP、FGF21靶点进一步组合的思路一致。

IL-15、VEGF/Ang2双抗（下图）、生长激素均为靶点follow，通过xLONGylation技术延长半衰期并通过ERP效应更好地富集在肿瘤微环境，由此开发better类药物的设计思路。罗氏VEGF/Ang2双抗已经在AMD适应症2期临床取得成功、IL-15也是热门的肿瘤免疫细胞因子，恒瑞医药、博际生物的IL-15融合蛋白已经申报临床。

透明质酸酶是Halozyme的主打产品，一方面可以单独作为抗肿瘤药物，降解肿瘤组织中的透明质酸，使得免疫细胞可以更好的接触和杀伤肿瘤细胞，另一方面，作为蛋白药物制剂的辅料，可以降解皮下透明质酸，增加给药体积，变很多静脉注射剂型为皮下注射。如罗氏的Herceptin+Perjeta复方制剂、强生的Darzalex皮下注射剂型均已获得FDA批准。道尔也开发了作为抗肿瘤药物的透明质酸酶。

总结

道尔生物在技术平台搭建方面下了不少功夫，PAE技术体现了创始人在蛋白工程上的经验。道尔生物同时将PAE技术用于前抗体的构建，用于屏蔽抗体和肿瘤组织的抗体富集。MultipleBody为基于纳米抗体的双抗/多抗平台，本身并不需要太多底层技术。在靶点组合上，道尔生物采取了更激进的策略，如三功能蛋白和三特异性抗体等，这也是后来者想要突出重围的必要策略。总之，在国内新药研发follow为主流、过度竞争的大背景下，所有人都是在差异化创新和开发风险上平衡。道尔生物这样勇于做二次创新的勇气，是值得尊重的。

参考文献

• PASylation: a biological alternative to PEGylation for extending the plasma half-life of pharmaceutically active proteins(2013)；
• PASylation®: A versatile technology to extend drug delivery（2017）.

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