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你的小鼠有资格进SPF级动物房吗?

2017-04-13 黄安玲 邦耀实验室

导语
中国和美国的实验室也许能够找到几乎一样的SPF小鼠,却没人敢保证可以在上海和纽约的宠物店买到同样的“脏鼠”?似乎干净的小鼠都是一致的,而污染的小鼠却各有各的疾病。试想如果将这些“脏鼠”作为模式生物,不稳定的性状和难以重复的实验数据的定会令人头疼。因此稳定的无菌的SPF小鼠对于科研筒子们来说至关重要。


很多人肯定有这样的疑问,面对美国jax或者其他动物房来源的小鼠,路途跋涉,如何保证小鼠干净并顺利进入SPF动物房呢?照个紫外,灭灭菌传递进去就好了?然而事情似乎远远比我们想象的要复杂,下面就一起跟随着小鼠感受一下它所经历的考验吧。


SPF级动物房系统


为了保证小鼠的健康和疾病预防,一般外来小鼠必须经过隔离和净化才能进入如上图所示的SPF级动物房内生活。原来小鼠过上养尊处优的生活也是蛮不容易的呢!


隔离和净化目的:疾病防疫,防止鼠群感染


作为实验动物,实验前必须要确定健康无病,一般国内外最广泛使用的即SPF级,指体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,实际上在指无传染病的健康动物。为了避免实验小鼠群体被感染疾病,保持鼠群的健康,必须对外来小鼠做好疾病预防工作。


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什么是隔离?


将进出境或国内调运的有关动物在检疫机关指定的场所内,于隔离条件下进行饲养,并在其生长期间进行检验、检测和处理的一项措施,通过隔离检疫可以避免或减少前期微生物风险预评中的漏检问题,更为有效的控制有害生物的输入或输出。


隔离环境:以隔离器为主体及其它附属装置组成的饲养系统,是独立通风饲养系统、进入的全新风洁净度达100级,无菌并维持正压状态,一切物品都要严格灭菌后经传递窗送入,操作时,工作人员只能通过隔离器上的橡胶手套来进行饲养或实验。


隔离器系统


隔离的步骤:


按规定,凡进口小鼠,必须在隔离室进行检疫观察饲养1个月,隔离结束后,根据实验需求继续国内配送小鼠或转入净化、代繁部门。


隔离分为两种:

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① 输入隔离:进口小鼠

如直接引进JAX来源小鼠,必须隔离器满1个月,并提供相应的隔离检疫报告


② 输出隔离:出口小鼠

小鼠进入隔离器隔离,一个月内,按照出入境及外方检疫要求安排微生物检测,出具检测报告,以备出口单证使用


2
什么是净化?


针对于外来小鼠需要进入无菌动物房,由于各种原因如接触到外界环境,小鼠可能被病原体感染,为了保证小鼠健康,干净净地顺利进入动物房,必须经过净化这一步。如下:


 

 净化目前的技术主要是:体外受精--胚胎移植(IVF-ET)技术


体外受精(In Vitro Fertilization, IVF)和胚胎移植(Embryo Transfer,ET)

IVF-ET技术基本原理:小鼠自身虽然可能被感染,但是小鼠的精子或卵细胞在体内是干净无菌,借用体外受精这项辅助生殖技术,将雄性小鼠精子和雌鼠的卵细胞交配得到受精卵后,再“借腹生子”移植到代孕小鼠,得到您需要更多的SPF级小鼠。

 

随着基因修饰的小鼠大量涌现,我们却经常面临着小鼠数目不够,如从国外代购的小鼠只有4-5只,或者友情赠送2只转基因小鼠,这样的数量很多时候无法满足我们实验的需求,IVF技术既可以满足小鼠净化,又可以获得更多转基因小鼠。


下面我们以这类基因修饰的小鼠为例,假设只提供雄鼠为例,介绍净化步骤:

(IVF-ET技术具体步骤可参考我们往期的实验技巧文章2.4和2.8)



注意,净化基因修饰小鼠有几种情况:


① 如果提供的是雄性小鼠,一般2-3只,一般得到的是杂合子,周期:2-3个月,

如果还需要得到纯合子,周期更长,大概5-6个月

② 如果提供雄性(2-3只)和雌性小鼠(10只以上),获得纯合子,周期:2-3个月

 

体外受精技术优点:


目前小鼠体外受精、胚胎移植技术已经是相当成熟, 有时只需要一只雄鼠,超排技术获得大量的卵后,就能进行体外受精和胚胎移植, 既可节省动物, 也可加速生物净化节奏。


特别是针对基因编辑小鼠:大多数的转基因、敲除或者单基因突变的品系多半呈现生育和哺育幼仔能力低下,IVF-ET技术既可达到净化目的, 又加速种群的繁殖。

 

鉴于此,您完全不用再担忧您的小鼠不够干净或者数目不够,只要经过了隔离或者净化,您的小鼠就有资格进入动物房进行试验了,就不怕得不到可靠的实验数据了。


真开心,终于到动物房里的小哥哥手上啦


最后,请容许小编给大家介绍一下,我们邦耀实验室的动物房的资质。它是上海出入境检验检疫局指定的实验大小鼠隔离检疫场所,拥有多年的进出口实验动物经验,具有进出口代理大小鼠的资质。可以最快速度为您提供代购、进出口、隔离检疫、生物净化、人工辅助生殖等一站式服务,所以如果您的实验需要代购大小鼠,或是生物净化,可以随时与我们联系,高效温馨的服务是我们的宗旨。


精彩内容列表(持续更新)

模式动物系列(—)小鼠基本信息

1.1 常见大小鼠品系

1.2 如何进行小鼠科学地饲养

1.3 小鼠的一生及繁育过程

1.4 ICR小鼠绝美写真

1.5 小鼠隔离与净化


2. 模式动物系列(二)基因编辑鼠

2.1  基因编辑鼠的构建

2.2  gRNA设计和筛选

2.3  sgRNA表达载体构建

2.4  显微注射操作步骤及要点

2.5  小鼠培育及繁殖过程

2.6  小鼠基因型鉴定

2.7  小鼠保种方式(精子、胚胎冻存)

2.8  小鼠体外受精介绍


3. 模式动物系列(三)疾病动物模型

3.1 疾病动物模型基本介绍

3.2 免疫缺陷动物

3.3 人源化动物

3.4 肿瘤动物模型介绍

3.5 肿瘤模型之生长、转移及复发模型

3.6 免疫疗法相关肿瘤模型介绍


4.  实践中的实验动物福利和伦理

4.1 Nature论文险被撤稿,你的动物实验合乎动物福利和伦理吗?


5. 小鼠命名规则

5.1 常见小鼠命名规则

5.2 基因工程鼠命名规则(上)——定点突变小鼠

5.3 基因工程鼠命名规则(下)——转基因小鼠


6. 代谢综合征动物模型

6.1 糖尿病动物模型综述

6.2 1型糖尿病动物模型介绍

6.3 2型糖尿病动物模型介绍


7.1 肝损伤动物模型介绍


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