近日，DEM Biopharma宣布获得7000万美元的投资，辉瑞（Pfizer）风投部参与。这笔资金将用于进一步开发巨噬细胞靶点发现平台CHoMP™ ，以达到扩增新颖靶标与推进癌症疗法的目的。CHoMP平台旨在将癌细胞、原代巨噬细胞与其他先天免疫效应细胞进行共同培养，并通过CRISPR筛选技术，以一种系统性、无偏倚性的方式来发现那些未曾被识别的DEM与EM信号。目前CHoMP平台已经发现了一些新的DEM/EM信号，包括新颖DEM通路APMAP。临床前研究发现，靶向APMAP可以加强肿瘤细胞吞噬作用。在许多不同类别的肿瘤细胞与动物肿瘤模型内皆观察到这一现象。此外，靶向APMAP也被发现与许多抗肿瘤抗体产生协同效应。在此基础上DEM Bio开创了一些新型免疫治疗方法，通过靶向癌细胞和巨噬细胞上的新型“别吃我”（DEM）和“吃我”（EM）信号来释放巨噬细胞和其他骨髓效应细胞以消除肿瘤，目前官方暂未披露相关项目的临床进展。治疗通路的发现并非一蹴而就，尽管目前已知的DEM与EM通路是研究上偶然的发现，但人体内除了DEM与EM信号还有诸多尚未发现且有潜力成为靶标的信号通路。DEM BioPharma旨在无偏倚、系统化地探索针对新型先天免疫系统检查点进而消除癌症的疗法，这是该公司与其他同类型免疫疗法公司的差异，也是它的核心竞争力因素之一。Weiskopf博士说：“通过利用尖端的功能基因组学和巨噬细胞生物学，我们创建了CHoMP平台，以完全系统化的方式发现新的DEM/EM信号”。DEM Bio的创始人与首席执行官David Donabedian博士说：“APMAP仅是我们使用CHoMP平台所发现极具希望的项目之一，而在此通路上的初步成功数据帮助我们确认，我们这项用以发现新颖、重要的DEM/EM信号的独特平台是可行的，我们公司打算利用获得的投资款将我们的平台作进一步的开发，以达到扩增新颖靶标与推进癌症疗法的目的。”除了DEM Biopharma发现的APMAP通路之外，目前发现的调节巨噬细胞吞噬的信号途径还有三种，分别是白细胞免疫球蛋白样受体B(LILRB) /主要组织相容性复合体I类分子(MHCI)，CD47/抑制信号调节蛋白α(SIRPα)和CD24/唾液酸结合免疫球蛋白型凝集素10(Siglec-10)。LILRB属于I型跨膜糖蛋白，为免疫抑制性受体。LILRBs在免疫细胞、破骨细胞、神经细胞和肿瘤细胞等多种细胞广泛表达，并能够识别多种配体。它与主要配体主要组织相容性复合体I（MHCI）结合后可介导免疫细胞激活的负调控。
MHCI是由HLAα链和β2-微球蛋白（β2M）形成的复合体，某些肿瘤细胞高表达β2M，其可与巨噬细胞上的LILRB1结合以抑制吞噬作用，导致免疫监视丧失。因此，在肿瘤细胞上MHCI正常或高表达的患者中，靶向MHCI/LILRB1轴的药物可能促进抗肿瘤免疫反应，并与靶向CD47/SIRPα轴的药物发挥协同作用。CD47是一种在大多数恶性肿瘤中过表达的膜结合蛋白，其主要配体信号调节蛋白α（SIRPα）是一种在髓细胞膜上高表达的跨膜蛋白，其胞外区的N末端可与CD47结合，导致免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM）上的酪氨酸磷酸化，释放“不要吃我”信号，从而抑制巨噬细胞介导的吞噬作用，保护正常细胞免受免疫系统的破坏。研究表明CD47在多种肿瘤中高表达，如恶性血液肿瘤和肝细胞癌（HCC），这也与不良预后相关。给予CD47阻断抗体或靶向灭活CD47基因可显著抑制肿瘤生长。阻断CD47与SIRPα相互作用的治疗策略已显示出在癌症治疗中的有效性，如靶向CD47的抗体、沉默CD47的RNA干扰（RNAi）以及靶向调控CD47和/贩运通路的药。此外，抗CD47治疗还可以改变TME中巨噬细胞的极化状态，诱导TAM转化为抗肿瘤状态。CD24是一种小的重糖基化抗原，在多种癌症类型（包括卵巢癌）中过表达。CD24表达与癌细胞的发育、侵袭和转移有关。现有研究已经证实，CD24与卵巢癌发生发展及预后均有非常紧密的联系，肿瘤细胞高表达CD24，而TAM高表达Siglec-10。与CD24结合后，Siglec-10的ITIM可招募并激活含有SH2结构域的酪氨酸磷酸酶SHP-1或SHP-2，从而阻断巨噬细胞吞噬所需的细胞骨架重排，触发抑制性信号转导级联。“别吃我”发出CD47、β2M和CD24信号，这些信号都涉及基于ITIM的巨噬细胞信号，导致巨噬细胞耐药癌细胞亚群的免疫选择，使肿瘤细胞逃避巨噬细胞的监视和清除。因此，掌握肿瘤细胞表达抗吞噬信号的机制可以更好地预测治疗效果以及靶向治疗。DEM Biopharma发现的新型免疫治疗方法是巨噬细胞免疫治疗的一种，目前巨噬细胞的免疫治疗可分为两种类型，分别是CAR-巨噬细胞和靶向肿瘤相关巨噬细胞（TAM），并且都取得了一定的进展。M细胞有针对实体瘤的先天优势，但是M细胞存在扩增、转染等方面的技术难题，而且关于M细胞的基础研究明显落后于T细胞，导致CAR-M在长时间里没有突破。CAR-M赛道相对于CAR-T赛道也显得异常冷清。根据Clinicaltrials平台的数据，目前正在进行的CAR-M疗法试验仅有两项，其中CT-0508进展最快。▲ CAR M试验(图片来源:Clinicaltrials)2020年7月27日，首个治疗HER2阳性实体瘤的CAR-M疗法先导药物CT-0508（靶向HER2）获得FDA批准进入临床研究，2021年3月完成首次给药，2021年9月获得美国FDA授予快速通道资格。在临床前研究中，已经证明其能够进入肿瘤、吞噬和杀死癌细胞、改变肿瘤微环境并且吸引和激活适应性免疫细胞，一期临床试验早期数据也证明其安全性。另一个CAR-M疗法是Maxyte公司的MCY-M11，它利用mRNA转染PBMC表达靶向间皮素的CAR（包括CAR-M），治疗复发/难治性卵巢癌和腹膜间皮瘤患者，目前正在招募志愿者进行I期临床试验。随着CAR-T技术带动细胞治疗行业的发展，以及研究人员对M细胞的进一步了解，我们也看到了CAR-M突破实体瘤的曙光。但我们也要清楚CAR-M刚起步，前方还有诸多困难，需要无数科学家为之奋斗。目前已有诸多研究表明TAM有助于化疗耐药性,有许多以TAM为靶点的单一疗法或联合化疗的治疗方法正在临床前和临床中进行试验。TAM可被巨噬细胞集落刺激因子1受体（CSF-1）招募到肿瘤微环境(TME)中，促进乳腺癌的发展和转移。目前，有用单克隆抗体或小分子化合物靶向CSF-1/CSF-1R轴的治疗方法正在试验中。罗氏的RG7155是一种靶向CSF-1R的单克隆抗体，在RG7155用于治疗7名诊断为弥漫型巨细胞瘤的患者的的1期临床试验（NCT01494688），所有患者均出现PR，2名患者出现CR。此外，在RG7155治疗的患者肿瘤活检中，CD68+CD163+巨噬细胞的数量减少，表明TAM向TME的募集减少。第一三共的靶向CSF-1R、c-Kit和Flt3的酪氨酸激酶抑制剂PLX3397能够使TAM的M2表型去极化来阻断肿瘤进展。PLX3397正在包括黑色素瘤（NCT02071940、NCT02975700）、前列腺癌（NCT0149043）和胶质母细胞瘤（NCT01349036）患者中进行临床试验。其他CSF-1R抑制剂，如ARRY-382（NCT01316822）、BLZ945（NCT02829723）、AMG820（NCT01444404）和IMC-CS4（NCT01346358）也正在各种实体瘤患者中进行测试。除了单药治疗外，针对CSF-1或CSF-1R的抑制剂还与化疗联合进行测试。例如，PLX3397与紫杉醇联合用于晚期实体瘤患者（NCT01525602）；PLX3397与化疗药甲磺酸艾瑞布林(eribulin)联合用于乳腺癌患者的试验（NCT01596751）；PLX3397联合西罗莫司(sirolimus)用于晚期肉瘤患者（NCT02584647）；PLX3397与维罗非尼(vemurafenib)用于BRAF突变黑色素瘤患者（NCT01826448）等。巨噬细胞在肿瘤微环境中是一把双刃剑。一方面巨噬细胞作为肿瘤基质细胞的重要组成部分，可以聚集在血管周围，诱导血管生成，促进肿瘤侵袭。另一方面，它们还可以吞噬癌细胞，重塑肿瘤微环境。但总的来说，巨噬细胞为肿瘤免疫治疗提供了更多的选择以及不可低估的力量，关于巨噬细胞更多的研究将会为肿瘤治疗打开一扇新的大门。为了应对各种恶性肿瘤，未来需要探索更多巨噬细胞的联合治疗策略。1.https://www.businesswire.com/news/home/20220623005116/en/DEM-BioPharma-Launches-with-70-Million-Financing2.https://mp.weixin.qq.com/s/gEGL8L0G_0Hb5A05uw6yXA